【摘 要】
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毛白杨是中国特有的乡土树种,具有许多优良特性,如适应性强,生长周期短,木材质量高等.然而它在NaCl含量超过0.3％的土壤中不能正常生长.这也是影响毛白杨在中国大面积推广的主
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毛白杨是中国特有的乡土树种,具有许多优良特性,如适应性强,生长周期短,木材质量高等.然而它在NaCl含量超过0.3％的土壤中不能正常生长.这也是影响毛白杨在中国大面积推广的主要原因之一.利用基因技术导入抗性基因是解决抗性造林树种培育有重要途径.因此,该文旨在利用基因工程方法研究和培育耐盐的毛白杨植株.建立高效的再生系统是进行遗传转化的前提条件.该文选用MS作为基本培养基,以叶片作为外植体,单独添6-BA 1.5mg/L时,不定芽分化率达到90％,同时伴随一定程度的下班化现象.单独添加NAA 0.3mg/L时,不定根产生率高达90％,但无不定芽生成.采用6-BA 1.0mg/L+NAA 0.3mg/L组合搭配时,不定芽分化率最高(95％).以MS-6-BA 1.0mg/L+NAA 0.3mg/L作为基本培养基配方,研究了不同着生位置的叶睡,同一着生位置叶片的不同切段以及叶片在培养基上的放置方式对再生不定芽的影响,同时还对不同的外植体类型再生不定芽能力进行了比较分析.结果表明带有叶柄的下切段比其余叶片切段不定芽再生率高,幼嫩叶片比老化叶片再生率高,叶片远轴端向下接触培养基比近轴端向下接触培养基不定芽再生率高.但叶片、叶柄及茎段三种外植体类型在再生率与出芽数上彼此差别不大.该文还研究了不同类型培养基(WPM、MS、B5)对叶片再生不定芽的影响,结果发现毛白杨叶片再生率在这三种培养基上无明显差异.在上述研究的基础上,深入研究了卡那霉素和头孢霉素对毛白杨叶片不定芽再生和无菌苗生根的影响.另外,通过根癌农杆菌介导将山菠菜AhDREB1基因导入毛白杨叶片,获得了卡那霉素抗性植株.并对卡那霉素抗性植株进行PCR及PCR-Southern检测,结果表明,AhDREB1基因已整合到毛白杨基因组中.
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