铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药性及其耐药表型与外排泵表达的关系

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目的:了解我院临床分离的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)对8种常用抗假单胞菌药物的耐药性;了解外排泵抑制剂Carbonylcyanide m-chlorophenylhydrazone(CCCP)与Phe-Arg-β-naphthylamide(PAβN)对耐亚胺培南和美罗培南铜绿假单胞菌菌株体外敏感性的影响:探索临床铜绿假单胞菌菌株对亚胺培南和美罗培南耐药性差异及其与外排泵表达水平及膜孔蛋白OprD2变化之间的关系。 方法:对四川大学华西医院2005年1月~2005年7月从临床分离到的142株非重复Pa按NCCLS(National Committee for ClinicalLaboratory Standards)推荐的琼脂对倍稀释法测定亚胺培南(IMP)、美罗培南(MEP)、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、头孢他定、氨曲南、环丙沙星及阿米卡星8种常用抗假单胞菌药物的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC);选用对亚胺培南耐药的107株Pa进行泵抑制剂CCCP和PAβN的抑制试验,观察亚胺培南和美罗培南的敏感性变化;对筛选出来的32株对亚胺培南和美罗培南不同耐药表型的Pa,采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法,检测外膜蛋白OprD2相对含量,采用实时荧光定量PCR(Real Time
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