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背景胃癌是发病率和死亡率极高的消化道恶性肿瘤,目前,手术切除肿瘤为主的综合治疗仍是胃癌治疗的主要手段。虽然手术技巧逐渐成熟、完善,相当多的胃癌患者接受胃癌根治术后,仍会出现远处转移和局部复发,而手术造成的医源性肿瘤播散可能是其原因之一。动物研究发现:手术中对肿瘤组织的操作会促使肿瘤细胞通过血流播散,并形成远处转移。为了尽量减少因手术因素造成的肿瘤细胞的医源性播散,学者们提出了“肿瘤不接触阻断技术”。目的通过动物实验,验证“阻断新技术”对阻断术中肿瘤细胞播散的有效性:阻断新技术能否阻断在进行胃切除术过程中脱落的肿瘤细胞向血及淋巴系统的播散。方法1.随机将20只新西兰白兔分为2组,每组10只,用两种方法建立兔胃VX2移植瘤模型:肿瘤细胞悬液注射组:在胃体前壁做荷包缝合,在其中心将VX2肿瘤细胞注射入浆膜下后收紧荷包关闭注射口;肿瘤组织块植入组:在胃体前壁浆膜做切口建立浆膜下隧道,将VX2肿瘤组织条植入后缝合浆膜切口。每组在接种后1周、2周及3周分别处死2只、4只及2只白兔,对4周及4周以后自然死亡的白兔进行尸检,观察胃移植瘤的生长及转移特点。2.利用肿瘤组织块植入法建立18只兔胃VX2移植瘤模型,在第2周时进行胃大部切除手术,术前随机将白兔分为3组,每组6只:阻断组（阻断新技术+近端胃大部切除术）、未阻断组（近端胃大部切除术）及对照组（不进行胃切除术,仅切除胃淋巴结）。阻断组先用7#丝线缝扎肿瘤周围的胃左、右动静脉及胃网膜左、右动静脉四根主干血管,并结扎网膜血管弓通向大网膜的血管分支,用双股7#丝线扎闭胃移植瘤远近端胃壁,以阻断区域胃壁颜色转为暗红色、静脉轻度曲张作为阻断成功的标志,完成阻断新技术后行近端胃大部切除术。未阻断组进腹后直接行近端胃大部切除术,不使用阻断新技术。阻断组与非阻断组均在进腹后迅速抽取2ml门静脉血,再在术中横断胃远端并翻转胃时（术中对胃移植瘤牵拉最明显时）复抽取2ml门静脉血,术后取胃淋巴结。对照组则在进腹后,不接触胃移植瘤,不进行胃手术,不抽取门静脉血,仅切除胃淋巴结。3.利用红细胞溶液将血标本制成单核细胞悬液,利用物理粉碎法将胃淋巴结制成组织匀浆,在显微镜下调节细胞浓度为1×106/ml,加入兔抗人细胞角蛋白（CK）抗体AE1/AE3、异硫氰荧光素（FITC）（流式细胞仪中表现为绿色荧光）标记的山羊抗兔IgG二抗及DNA染色剂碘化丙酊（PI）（流式细胞仪中表现为红色荧光）,然后将标本送双通道流式细胞仪检测,每次上机至少检测105细胞。通过设置前向角散射（FSC）和侧向角散射（SSC）双参数,尽量排除标本中的各种碎片、小颗粒及细胞集团,阀门设定为绿色荧光最强的细胞群。流式细胞仪检测结果用散点图表示,将CK-FITC作为横坐标,PI作为纵坐标,右上象限的CK-PI双阳性细胞即为VX2肿瘤细胞,右上象限细胞在105上机检测细胞中的百分率（%）即为每个标本中VX2肿瘤细胞的阳性率（%）。4.利用Stata7.0软件进行统计学分析,将流式细胞术检测得到的各组结果进行正态性及方差齐性检验,将结果表示为均数±标准差,组间数据的比较采用t检验,P<0.05时,差异具有统计学意义。结果1.使用细胞悬液注射法及组织块植入法均可成功建立兔胃VX2移植瘤模型,两种方法的成瘤率均为100%,接种后第1周时便可观察到肿瘤的生长,2周时肿瘤明显增大,3周时肿瘤生长最快,4周以后便开始出现肿瘤的广泛转移（胃周肿大融合的淋巴结、膈肌转移及肝脏转移）,兔出现腹水等恶液质表现,开始衰竭、死亡。在细胞悬液注射组,当发生肿瘤细胞悬液渗漏时,会形成肿瘤在腹腔及腹壁的广泛种植,而在组织块植入组则无此种现象的发生。（1）细胞悬液注射法建立胃移植瘤后,第1周时胃移植瘤直径为0.15±0.07cm,第2周时为0.70±0.42cm,第3周时为1.65±0.21cm,第4周及以后为2.25±1.06cm。（2）组织块移植法建立胃移植瘤后,第1周时胃移植瘤直径为0.40±0.10cm,第2周时为1.18±0.21cm,第3周时为1.78±0.39cm,第4周以后为3.50±1.08cm。2.经Stata7.0软件检测,阻断组及未阻断组中术前门静脉血、术中门静脉血及术后胃淋巴结中的肿瘤细胞阳性率,对照组中的术前胃淋巴结肿瘤细胞阳性率均呈正态性分布,方差齐。（1）阻断组术中门静脉血中肿瘤细胞阳性率平均值为43.30%,与术前的32.62%无显著性差异（P>0.05）;术后胃淋巴结中肿瘤细胞阳性率平均值为35.86%,与术前的22.08%无显著性差异（P>0.05）。（2）未阻断组术中门静脉血中肿瘤细胞阳性率平均值为60.10%,明显高于术前的20.59%（P<0.05）;术后胃淋巴结中肿瘤细胞阳性率平均值为51.59%,明显高于术前的22.08%（P<0.05）。（3）阻断组胃切除术中播散入血的VX2肿瘤细胞阳性率平均值为10.67%,未阻断组为39.51%,差别具有统计学意义（P<0.05）;（4）阻断组胃切除术中进入淋巴系统的VX2肿瘤细胞阳性率平均值为9.42%,未阻断组为27.84%,差别具有统计学意义（P<0.05）。结论1.使用细胞悬液注射法及组织块植入法均可成功建立兔胃VX2移植瘤模型,其生长及转移方式与人胃癌相似。而利用肿瘤组织肿块植入法建立兔胃VX2移植瘤模型操作更为方便,肿瘤细胞不易渗漏,移植瘤生长较快,为胃癌的基础研究提供了一个比较理想的大动物模型。2.手术操作可引起术中脱落的肿瘤细胞向血及淋巴系统播散,阻断新技术可有效阻断此现象。