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研究背景:脉络膜新生血管(CNV)在多种眼部疾病中可以导致视力的严重损害,最常见伴有CNV的疾病有年龄相关性黄斑变性(AMD),血管纹样改变(AS),病理性近视和眼假组织胞浆菌病综合症(POHS)等。新生血管源自于脉络膜毛细血管层,突破Bruch膜形成黄斑下新生血管膜。新生血管是脆弱和易渗漏的,易导致出血或渗出,这些都损害了光感受器细胞,并且这些增生血管能够形成纤维瘢痕,从而导致视网膜功能不可逆损害和视力丧失。CNV生成是局部促血管生成因子与抑血管生成因子失衡所致。血管内皮生长因子(VEGF)是目前已知最强的促血管生成因子,能够刺激内皮细胞增生和增加血管内皮细胞的渗透性。诱导型环氧化酶(COX-2)已被证实能够调节VEGF,并且在人类和实验性肿瘤中COX-2是一种重要的促血管生成因子。COX-2在AMD患者CNV中和激光诱导的小鼠CNV中均有表达,且选择性COX-2抑制剂能够抑制CNV,但尚存争议。选择性COX-2抑制剂—塞来昔布是唯一被美国食品和药品管理局(FDA)批准用于家族性多发性腺癌(FAP)患者的非甾体抗炎药。研究选择性COX-2抑制剂—塞来昔布玻璃体内注射能否抑制激光诱导的大鼠CNV及其机制,有助于揭示CNV生成机制,并为CNV相关疾病的治疗提供新的思路。目的:观察玻璃体内注射塞来昔布对激光诱导的BN大鼠CNV的抑制作用,并探索其机制。方法:532nm激光诱导实验性BN大鼠CNV。激光光凝后,立即将6只大鼠随机分为给药组(n=3)和对照组(n=3),分别玻璃体内注射1mg/ml塞来昔布10μl和0.01M PBS10μl,14d后行HE染色(n=3)和脉络膜铺片(n=3),分别检测CNV的厚度和面积。将33只BN大鼠随机分为正常对照组(6只)、光凝后1d组(6只)、光凝后3d组(6只)、光凝后7d组(9只)和光凝后14d组(6只)。光凝后7d,采用免疫组织化学染色检测COX-2和VEGF在CNV中的表达特征(n=3)。Western Blotting(n=3)和RT-PCR(n=3)分别检测正常对照组和光凝后1d、3d、7d、14d时,COX-2和VEGF蛋白及mRNA表达时相的变化。激光光凝后,将12只大鼠随机分为给药组(n=6)和对照组(n=6),分别玻璃体内注射1mg/ml塞来昔布10μl和0.01M PBS10μl,7d后Western Blotting(n=3)和RT-PCR(n=3)检测给药组和对照组COX-2 mRNA和VEGF蛋白及其mRNA。结果:光凝后14d,给药组与对照组比较,CNV厚度和面积明显减小(P<0.01)。COX-2与VEGF在CNV中的血管内皮细胞和基质细胞中高表达,并且COX-2及其mRNA的表达早于VEGF及其mRNA的表达,COX-2与VEGF表达高峰与正常对照组之间比较明显升高(P<0.01)。光凝后7d,给药组与对照组比较,VEGF及其mRNA表达下降(P<0.05),而COX-2 mRNA无明显变化(P>0.05)。结论:玻璃体内注射塞来昔布能够抑制激光诱导的大鼠CNV的厚度和面积。COX-2在激光诱导的大鼠CNV生成早期表达上调,通过调控VEGF表达而起重要作用。