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[研究目的]
本实验旨在研究人参皂甙Rg1对盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)术诱导的脓毒症小鼠是否有治疗作用及探索人参皂甙Rg1治疗脓毒症可能的机制。
[研究方法]
1、建立盲肠结扎穿孔法诱导脓毒症小鼠模型,观察人参皂甙Rg1对脓毒症小鼠7天生存率的影响。
2、检测人参皂甙Rg1对脓毒症小鼠血液及腹腔灌洗液中细菌负荷的影响。
3、采用HE染色法检测人参皂甙Rg1对脓毒症小鼠肝脏、肺脏的保护作用。
4、采用ELISA法检测人参皂甙Rg1对脓毒症小鼠血浆细胞因子水平的影响。
5、采用AV-PI法检测人参皂甙Rg1对脓毒症小鼠胸腺CD3+T细胞凋亡的影响。
6、采用流式细胞术检测人参皂甙Rg1对脓毒症小鼠腹腔灌洗液中中性粒细胞、脾脏CD4+T淋巴细胞,CD8+T淋巴细胞,CD11c+树突状细胞和CD19+B淋巴细胞数目的影响。
7、采用TUNEL法检测人参皂甙Rg1对脓毒症小鼠脾脏细胞凋亡的影响。
[结果]
1、给予人参皂甙Rg1治疗的脓毒症小鼠7天生存率明显高于CLP组(P<0.01)。
2、人参皂甙Rg1干预的脓毒症小鼠腹腔灌洗液、血液的细菌负荷明显低于CLP组(P<0.01)。
3、给予人参皂甙Rg1后,能够明显减轻脓毒症导致的肝脏、肺脏损伤程度;人参皂甙Rg1干预的脓毒症小鼠肝脏、肺脏病理评分明显低于CLP组(P<0.05)。
4、人参皂甙Rg1干预后,脓毒症小鼠血浆细胞因子TNF-α、IL-10的水平显著低于CLP组(P<0.01)。IL-6的水平也显著低于CLP组(P<0.05)。
5、给予人参皂甙Rg1后,脓毒症小鼠胸腺CD3+T淋巴细胞凋亡率明显低于CLP组(P<0.05)。
6、给予人参皂甙Rg1治疗的脓毒症小鼠腹腔灌洗液中中性粒细胞数目显著高于CLP组(P<0.01),同时脾脏CD4+,CD8+T淋巴细胞,CD11c+树突状细胞的数目明显高于CLP组(P<0.05)。
7、给予人参皂甙Rg1治疗的脓毒症小鼠TUNEL+脾脏细胞的平均荧光强度明显低于CLP组(P<0.05)。
[结论]
人参皂甙Rg1通过降低血浆细胞因子水平、增加腹腔中性粒细胞数目、改善脓毒症免疫细胞数目下降趋势及凋亡率,从而降低脓毒症小鼠机体的细菌负荷,减轻脓毒症小鼠重要脏器(肝脏、肺脏)的损伤程度,最终提高脓毒症小鼠生存率,达到治疗脓毒症的目的。