Fcγ受体在HBV感染的不同免疫状况下表达水平的变化

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背景及目的:乙型肝炎病毒(hepatitis B virus)感染出现多种临床阶段,这机制的形成一直是研究者研究的热点。一般认为,宿主遗传因素决定的个体免疫差异在HBV感染的临床转归中起决定作用。本课题组用HBV感染人外周血单核细胞(PBMC)进行全基因组表达谱芯片分析,发现HBV各组间与健康对照之间Fcγ受体基因表达存在显著差异。Fcγ受体是非常重要的免疫细胞表面分子,在机体免疫方面有很重要的作用。Fcγ受体有活化型和抑制型,其中活化型包括FcγR Ia/Ib、FcγRIIa、FcγR IIIa/IIIb这几种类型,FcγR IIb是唯一的抑制型受体。Fcγ受体在慢性乙型肝炎耐受期和清除期之间表达差异是否能区分两者,目前没有相关报道。本文旨在探讨活化型Fcγ受体和抑制型Fcγ受体在HBV感染不同免疫状况间或与健康对照之间表达变化,进行验证HBV感染后全基因组表达谱芯片的结果。以及Fcγ受体在慢性乙型肝炎中的表达差异,对慢性乙型肝炎耐受期和清除期的诊治价值。方法:收集HBV感染患者共64例(乙肝感染成功清除12例、慢性乙肝清除期32例、慢性乙肝耐受期20例),健康对照14例。实时定量聚合酶链反应测定单核细胞中FcγRs mRNA的表达水平。将慢性乙肝清除期及耐受期患者的AST、ALT与FcγRs mRNA表达水平进行相关性分析。结果:1、(1)Fcγ受体Ia型在乙肝感染者中的表达:健康对照组为1.01±0.19,慢性乙肝耐受组为0.78±0.12,乙肝感染成功清除组为0.12±0.06,慢性乙肝清除组为3.71±1.03。①慢性乙肝耐受组比乙肝感染成功清除组高0.66±0.06,两者之间差异有统计学意义(P=0.01)。②慢性乙肝清除组比慢性乙肝耐受组高2.93±0.91,两者之间差异有统计学意义(P=0.002)。③健康对照组比乙型感染成功清除组高0.89±0.13,两者之间差异有统计学意义(P=0.009)。④慢性乙肝清除组比健康对照组高2.70±0.84,两者之间差异有统计学意义(P=0.0097)。⑤慢性乙肝清除组比乙肝感染成功清除组高3.59±0.07,两者之间差异有统计学意义(P=0.0027)。(2)Fcγ受体Ⅰb型在乙肝感染者中的表达:健康对照组为1.00±0.75,乙肝感染成功清除组为4.11±1.75,慢性乙肝耐受组为0.93±0.14,慢性乙肝清除组为1.83±0.47。①乙肝感染成功清除组比慢性乙肝耐受组高3.18±0.61,两者表达差异有统计学意义(P=0.0478)。②乙肝感染成功清除组比健康对照组高3.11±1.00,两者表达差异有统计学意义(P=0.05)。(3) Fcγ受体Ⅱa型在乙肝感染者中的表达:健康对照组为0.95±0.37,慢性乙肝清除组为2.80±0.58,慢性乙肝耐受组为1.04±0.41,乙肝感染成功清除组1.57±0.69。①慢性乙肝清除组比慢性乙肝耐受组高1.74±0.17,两者表达差异有统计学意义(P=0.05)。②慢性乙肝清除组比健康对照组高1.85±0.21,两者表达差异有统计学意义(P=0.042)。(4)Fcγ受体Ⅱb型在乙肝感染者中的表达:健康对照组为1.01±0.28,慢性乙肝耐受组为3.72±1.21,慢性乙肝清除组为1.06±0.19,乙肝感染成功清除组为0.53±0.14。①慢性乙肝耐受组表达比乙肝感染成功清除组高3.19±1.07,两者表达差异有统计学意义(P=0.0016)。②慢性乙肝耐受组比健康对照组高2.71±0.93,两者表达差异有统计学意义(P=0.0093)。③慢性乙肝耐受组比慢性乙肝清除组高2.66±1.02,两者表达差异有统计学意义(P=0.0031)。(5)Fcγ受体IIIa型在乙肝感染者中的表达:健康对照组为1.07±0.22,慢性乙肝清除组为3.41±0.80,慢性乙肝耐受组为0.86±0.18,乙肝感染成功清除组为1.93±0.49。①慢性乙肝清除组比慢性乙肝耐受组高2.55±0.62,两者表达差异有统计学意义(P=0.0128)。②慢性乙肝清除组比健康对照组高2.34±0.58,两者表达差异有统计学意义(P=0.036)。(6)Fcγ受体IIIb型在乙肝感染者中的表达:健康对照组为1.04±0.12,慢性乙肝清除组为3.34±0.54,慢性乙肝耐受组为0.78±0.17,乙肝感染成功清除组为1.48±0.27。①慢性乙肝清除组比慢性乙肝耐受组高2.56±0.37,两者表达差异有统计学意义(P=0.0002)。②慢性乙肝清除组比乙肝感染成功清除组高1.86±0.27,两者表达差异有统计学意义(P=0.0127)。③慢性乙肝清除组比健康对照组高2.30±0.42,两者表达差异有统计学意义(P=0.0015)。④乙肝感染成功清除组比乙肝耐受组高0.30±0.00,两者表达差异有统计学意义(P=0.0186)。2、活化型FcγR Ia、FcγR IIa与ALT呈正相关,相关系数分别为0.52、0.52(P值分别为:0.02、0.002)。活化型FcγR Ia、FcγR IIa、与AST呈正相关,相关系数分别为0.36、0.43(P值分别为0.04、0.009),抑制型FcγR IIb与ALT、 AST呈负相关,相关系数分别为-0.50(P=0.003)、-0.53(P=0.005)。结论:1、HBV感染免疫清除期患者活化型Fcγ受体表达水平明显高于健康对照组和乙肝耐受期组,HBV感染免疫耐受期患者抑制型Fcγ IIa受体表达水平明显高于健康对照组和免疫清除期组,验证了本课题组前期关于HBV感染后全基因组表达谱芯片的结果—HBV各组间与健康对照之间Fcγ受体基因表达显著差异。2、活化型FcγR Ia、FcγR IIa的表达与ALT、AST呈正相关,抑制型FcγR IIb的表达与ALT、AST呈负相关。FcγR Ia、FcγR IIa、FcγRIIb在HBV感染患者中的表达差异有望成为区分慢性HBV感染免疫耐受期和免疫清除期标志物。
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