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目的：观察酪氨酸激酶、ER双抑制剂Genistein和ErbB2靶点的小分子酪氨酸激酶抑制剂GW2974联合治疗对乳腺癌耐药细胞株增殖和凋亡的影响，并探讨其可能机制，为临床治疗乳腺癌提供理论支持。
方法：采用GW2974（0.2-5μmol/L）浓度梯度递增培养法，持续给药两个月，建立人乳腺癌耐药细胞株rBT474;采用基因转染技术建立p85-erbB2高表达的人乳腺癌p85-ErbB2/MCF-7细胞，western blot及免疫荧光细胞化学法鉴定。选择Genistein、GW2974单独或联合作用于GW2974耐药细胞株BT474、rBT474、稳定转染细胞株p185ErbB2/MCF7、p85-ErbB2/MCF7（p85为ErbB2位于细胞核内的片段）、对照细胞株Vector/MCF7(转染了空载体的MCF7细胞株)，MTT法分别检测Genistein、GW2974单独使用以及联合用药对肿瘤细胞增殖能力的影响；用TUNEL细胞凋亡荧光检测试剂盒和流式细胞术检测药物处理后细胞的凋亡情况：用western blot方法检测药物处理后，细胞的ErbB2、P-erbB2、ER和相关增殖信号通路传导中的关键靶分子，如：AKT，P-AKT，Erk，P-Erk等的表达情况以及相关凋亡信号通路传到中的关键靶分子，如：p53，Bc12等的表达情况。
结果：GW2974与Genistein联合使用能够更加明显地抑制BT474耐药株、Vector/MCF7、p85-ErbB2/MCF7、ErbB2/MCF7细胞的增殖，促进细胞凋亡。GW2974单独应用能够抑制ErbB2磷酸化，Genistein可以激活p53抑癌基因，GW2974与Genistein联合使用不但抑制ErbB2蛋白的磷酸化，还抑制ErbB2蛋白总量以及ER的表达。同时还使细胞中磷酸化的Akt、磷酸化的Erk的表达减弱。
结论：GW2974与Genistein联合使用能够有效地抑制ErbB2和ER的表达并影响其相关信号通路的活化，导致对GW2974耐药的乳腺癌细胞株以及过表达ErbB2的ER阳性乳腺癌细胞株的生长抑制和凋亡。为临床上靶向ErbB2小分子酪氨酸激酶抑制剂耐药的病人耐药的病人以及ER、ErbB2共表达的乳腺癌患者的治疗提供了理论依据和一条用药的思路。