本文利用大肠杆菌中的核苷磷酸化酶酶法合成了胸苷和胞苷,并通过实验条件的优化,得到了较优的酶法生物合成胸苷和胞苷较佳的工艺路线,为今后的工业化大规模生产提供了一定的理论基础,具有重要的现实意义和社会经济价值。首先本文开展了游离细胞法合成胸苷和胞苷的工艺研究。以大肠杆菌中的核苷磷酸化酶为酶源,利用价廉的胞苷和胸腺嘧啶为反应底物来转化生成胸苷。通过考察菌体培养时间、反应时间、pH和温度等因素对转化率的影响,获得较佳的单因素反应条件。并在此基础上,设计了正交试验,确定出了最优的反应工艺。实验证明,20.0ml反应液（胞苷30.0mmol/L,胸腺嘧啶90.0mmol/L,pH为7.05的KOH—KH₂PO₄缓冲液,1.0g的E.coli湿菌体）,在60℃恒温反应5小时,胸苷的转化率可达到27.1%;pH为7.05的反应液,在60℃恒温反应4小时,胞苷可达到的最高转化率为12.3%。然后开展了固定化细胞法合成胸苷的研究,具体研究了细胞固定化材料及制备工艺。通过考察配方比例、钙化交联方法和保存方法等因素对固定化微球强度的影响,确定出了较佳的固定化微球的制备工艺。结果表明,海藻酸钠固定化微球最佳的制备条件:海藻酸钠2.0%,MgO1.4%,菌体10:1体积比混合,2.0%CaCl₂溶液做交联剂,室温静置4小时进行钙化。海藻酸钠固定化微球最佳的保存方法为冰冻保存法。聚乙烯醇固定化微球最佳的制备条件:聚乙烯醇10.0%,海藻酸钠0.8%,菌体3:1体积比混合,质量分数为4.0%的CaCl₂-饱和硼酸溶液作为交联剂,室温静置4小时进行交联。