雷帕霉素对裸鼠皮下种植的胶质瘤生长及AQP4表达的影响

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目的:通过对雷帕霉素的不同剂量组的裸鼠皮下种植的胶质瘤体积、肿瘤的重量、裸鼠的体重和肿瘤组织中的水通道-4(aquaporin-4 AQP4)水平的比较,探讨雷帕霉素对裸鼠皮下种植的胶质瘤生长、肿瘤组织中AQP4的表达是否有影响,是否呈剂量依赖性,为雷帕霉素治疗胶质瘤提供实验依据。方法:常规培养大鼠胶质瘤C6细胞(恶性程度四级)至指数生长期(25×107个细胞/m1),给予40只4-6周龄雄性BALB/c nu/nu裸鼠(裸小鼠纯合子)的左右腋后皮下接种C6细胞,每只裸鼠接种0.2 ml大鼠胶质瘤C6细胞悬液(每只裸鼠注射4~5×107个C6细胞),以此建立大鼠胶质瘤的裸鼠皮下种植瘤模型。10d以后,40只裸鼠全部荷瘤,荷瘤裸鼠随机被分为四组后,分别给予:雷帕霉素常规剂量组(1.5 mg/kg/d)(n=10)、低剂量组(0.15 mg/kg/d)(n=10)、高剂量组(4.5 mg/kg/d)(n=10),都给予雷帕霉素腹腔注射(雷帕霉素溶于二甲基亚砜中),按照0.1m1雷帕霉素/只腹腔注射给药;对照组(n=10)给予相同体积的二甲基亚砜(DMSO)腹腔注射,每天一次。用药干预期间密切观察裸鼠的一般生活状态和皮下种植瘤体积的变化,用药干预到21d后同时处死40只实验裸鼠,测量裸鼠皮下种植瘤的体积、肿瘤的重量,计算抑瘤率;称量裸鼠的体重;应用兔抗大鼠AQP4单克隆抗体进行免疫组织化学法检测皮下种植瘤组织中的AQP4表达水平。结果:与对照组比较:常规剂量的雷帕霉素明显地抑制了皮下种植瘤的生长(p<0.05),低剂量组、高剂量组皮下种植瘤的体积、肿瘤的重量均较对照组有所降低,但是都无统计学意义(p>0.05),并且常规剂量的雷帕霉素降低了皮下种植瘤的AQP4水平(p<0.05),低剂量组、高剂量组的皮下种植瘤的AQP4水平均受到一定程度的抑制,但是都无统计学意义(p>0.05),实验中还发现雷帕霉素常规剂量组的动物对药物耐受性良好,一般生活状态未受明显影响,可自由活动及进食;对照组动物活动度稍差;雷帕霉素高剂量组裸鼠的一般生活状态受到很大的影响,在用药8d左右出现食欲差、易激惹、皮肤薄、消瘦等症状,裸鼠的体重明显下降(p<0.05)。结论:1、常规剂量的雷帕霉素可以抑制裸鼠皮下种植的胶质瘤生长且不呈剂量依赖性,裸鼠的一般生活状态未受明显的影响;低剂量和高剂量的雷帕霉素不能抑制胶质瘤的裸鼠皮下种植瘤的生长;裸鼠不能耐受高剂量的雷帕霉素。2、常规剂量的雷帕霉素可以抑制裸鼠皮下种植的胶质瘤的AQP4的表达且不呈剂量依赖性。
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