论文部分内容阅读
防腐剂是一种重要的食品添加剂,在食品加工中应用广泛,越来越受到关注。不同国家允许添加的防腐剂种类及用量有所不同。在中国,用量最大的防腐剂为苯甲酸及其钠盐,但目前许多国家已经禁止添加苯甲酸及其钠盐作为防腐剂,且中国规定A级绿色食品中也不允许使用苯甲酸钠。对羟基苯甲酸酯类,双乙酸钠,山梨酸及其钾盐等是国际公认的较为安全的防腐剂,毒性均小于苯甲酸钠,但此三种防腐剂对藻类和HL7702细胞影响的研究较少。本文研究尼泊金丁酯钠,双乙酸钠,山梨酸钾对藻类的影响。在正常藻类生长pH(微碱性)下,尼泊金丁酯钠在浓度≤1.4×102mg/L时对特氏杜氏藻生长基本没有影响；在浓度为1.5×102～2.3×102mg/L时,随着浓度上升,对特氏杜氏藻的抑制作用越来越强；尼泊金丁酯钠在浓度≥1.7×102mg/L时对特氏杜氏藻有致死的作用。双乙酸钠在浓度<2.4×103mg/L时对特氏杜氏藻生长有略微促进作用；在浓度≥2.4×103mg/L时,可致特氏杜氏藻死亡。山梨酸钾在10g/L的浓度下对特氏杜氏藻的生长仍无影响。由于双乙酸钠及山梨酸钾为酸性防腐剂,故本研究将特氏杜氏藻生长培养基pH调至4.2～4.5之间,并维持1h。研究表明,将对数期的藻类pH调整到4.2～4.5范围下并维持1h,特氏杜氏藻会重新进入调整期,但对藻类的超氧化物歧化酶活性基本没有影响,而过氧化氢酶活性下降为正常藻类酶活力的70%；7d时,藻类培养基pH基本上升到正常生长pH(微碱性)并再次进入对数期,对藻类的生长并无太大影响。pH在4.2～4.5环境维持1h后,双乙酸钠在浓度≤15.0mg/L时特氏杜氏藻生长只受到pH影响而不受双乙酸钠的影响；双乙酸钠在浓度≥16.0mg/L时对特氏杜氏藻有致死作用。双乙酸钠浓度≤14.0mg/L时藻类的超氧化物歧化酶活性与正常藻类相同,双乙酸钠浓度≥14.0mg/L时藻类的超氧化物歧化酶活性下降至较低水平；双乙酸钠浓度<15.0mg/L时藻类的过氧化氢酶活性比正常藻类略低,只受到pH影响,未受到双乙酸钠影响；双乙酸钠浓度≥15.0mg/L时藻类过氧化氢酶活性下降至较低水平。酸性环境维持1h后,山梨酸钾在浓度为0～3.0mg/L范围内,特氏杜氏藻只受到pH影响而未受到山梨酸钾影响；山梨酸钾浓度在4.0～7.0mg/L时对特氏杜氏藻对有抑制作用；山梨酸钾浓度为8.0mg/L则对特氏杜氏藻有致死作用。山梨酸钾浓度在0～4.4mg/L时藻类的超氧化物歧化酶的活性与正常藻类基本相同,且未受pH影响。山梨酸钾浓度在4.8～8.0mg/L时的藻类的超氧化物歧化酶的活性下降至较低水平。山梨酸钾浓度在0-4.8mg/L时藻类的过氧化氢酶活性只受到pH影响,山梨酸钾浓度在5.2-8.0mg/L时,随着山梨酸钾浓度的上升,藻类过氧化氢酶活性受抑制程度逐渐增加,山梨酸钾浓度为8.0mg/L藻类的过氧化氢酶活性降至较低水平。本文也对尼泊金丁酯钠,双乙酸钠及山梨酸钾对HL7702细胞(正常人体肝细胞)的影响也进行了研究。尼泊金丁酯钠浓度≤62.5μg/mL时,HL7702细胞基本不受影响；100～1000μg/mL范围下,随着尼泊金丁酯钠浓度上升,HL7702细胞存活率从87%逐渐下降至11%, EC50=215.97μg/mL。浓度≤1000μg/mL,山梨酸钾及双乙酸钠对HL7702细胞均无影响,细胞存活率均≥90%。