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目的用基因工程法生产高质量低成本的GnRH疫苗。方法将人工合成的哺乳型GnRH六聚体基因插入麦芽糖结合蛋白融合表达系统pMAL-c2x中,重组质粒转化到大肠杆菌(E.coli BL21)中。采用IPTG进行诱导表达。用超声波细胞破碎仪破碎细菌。用多糖树脂(amylose resin)亲和层析法纯化蛋白。应用SDS-PAGE方法对纯化蛋白进行分析。采用间接ELISA方法鉴定融合蛋白的反应原性。并以小白鼠进行动物试验,观察其性腺发育情况以及睾丸组织学变化情况,从而鉴定融合蛋白的免疫原性。结果与麦芽糖结合蛋白基因融合的GnRH六聚体基因在E.coli BL21中能够高效表达;多糖树脂亲和层析方法,具有良好的纯化效果(浓度达4.06mg/ml);表达的融合蛋白分子量大小与理论值(53.5kD)一致;间接ELISA试验结果表明,融合蛋白与GnRH抗体的反应性较好,阳性组OD492值/阴性组OD492值>2.1;动物试验结果显示,试验组小白鼠睾丸的各项指标(长度、宽度、周长、重量)均小于对照组,并且睾丸长度和重量的前后差异极显著(7.6233mm vs 8.1200mm,P<0.01;0.09619g vs0.1137g,P<0.01),睾丸周长也显著降低(20.0867mm vs 21.6322mm,0.01<P<0.05),睾丸宽度的前后差异不显著(5.4200mm vs 5.5911mm,P>0.05);将睾丸制作切片后观察,发现实验组小白鼠睾丸生精小管变化明显,精原细胞、精母细胞、精子细胞层次不分明,间质结缔组织增生,且无精子产生,虽然有的睾丸有少量精子产生,但睾丸生精小管开始出现空泡变性。对照组小白鼠的睾丸生精小管结构正常,生精小管中有正常的精原细胞、精母细胞、精子细胞及精子,并且层次分明,有大量精子产生。这表明由麦芽糖结合蛋白融合表达系统表达的MBP-GnRH-6融合蛋白能够刺激小白鼠产生GnRH抗体,并使睾丸发生萎缩,MBP-GnRH-6融合蛋白有望成为GnRH疫苗用于家畜的免疫去势。