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本文对堆肥未培养微生物的宏基因组文库构建及新的木聚糖酶基因的克隆、鉴定和表达进行了研究。文章通过差速离心从自制堆肥样品中分离未培养微生物细胞，提取了其总DNA(metagenomic DNA)，末端平头化后，用柯斯质粒pWEB：：TNC为载体构建成了包含约5万个克隆的未培养微生物的宏基因组文库(metagenomiclibrary)，随机挑取其中的1 4个克隆提取质粒用BamHI酶切分析。结果显示所有的质粒都含有插入片段，最大为45kb，最小为25kb，平均大小为35kb，文库外源DNA总容量是1.8×106kb(1.8Gb)，14个质粒的酶切带型都不相同，说明文库克隆的DNA片段随机性比较大。