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目的:通过观察三七有效成分人参皂苷Rgl、青黛有效成分靛玉红对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠病理形态的影响,探讨其改善病理学征象的可能机理;通过研究其对核转录因子(NF-κB)激活和TNF-α、IL-6、IL-4等细胞因子表达的影响,及其对凝血功能的调节作用,以进一步探讨三七、青黛治疗UC的作用机制。
方法:用DSS复制实验性小鼠UC模型,将之随机分为靛玉红高剂量治疗组,靛玉红中剂量治疗组,靛玉红低剂量治疗组,人参皂苷Rgl高剂量治疗组,人参皂苷Rgl中剂量治疗组,人参皂苷Rgl低剂量治疗,靛玉红、人参皂苷Rgl联合治疗组,5-ASA治疗组,模型I组,模型II组,并设立正常对照组。其中模型I组于造模7d处死,其余各组用药7d处死。通过观察组织病理学表现,分析UC小鼠及其用药后的结肠黏膜变化:采用免疫组化、Western-blot、RT-PCR实验技术,检测小鼠结肠组织核转录因子NF-κBP65表达变化;ELISA、RT-PCR实验技术,检测小鼠结肠组织TNF-α、IL-6、IL-18促炎细胞因子和IL-4、IL-10抑炎细胞因子表达改变;采用放免法检测UC小鼠血浆血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的变化,分析造模后用药干预对UC小鼠凝血功能的影响。
结果:1)造模7d时,模型I组小鼠结肠黏膜出现急性炎症和溃疡形成。经过7d药物干预后模型II组小鼠结肠黏膜表现为炎症持续状态,而各用药组小鼠结肠黏膜较模型II组有明显改善。2)模型I组和正常组比较,结肠组织NF-κBP65表达明显增加;TNF-α、IL-6、IL-18表达显著升高,而IL-4、IL-10表达则降低;血浆TXB2升高、6-keto-PGF1α降低; PT、APTT、TT缩短。3)靛玉红中、中药三七、青黛有效成分对小鼠DSS性溃疡性结肠炎NF-κB和细胞因子表达的影响高剂量治疗组,人参皂苷Rgl中、高剂量治疗组,靛玉红、人参皂苷Rgl联合治疗组,5-ASA治疗组和模型II组比较,结肠组织核转录因子NF-κBP65表达明显减少;TNF-α、IL-6、IL-18表达明显降低,而IL-4、IL-10表达则显著升高;血浆TXB2降低,6-keto-PGF1α升高。
结论:三七有效成分人参皂苷Rgl、青黛有效成分靛玉红能有效治疗DSS诱导的UC小鼠结肠炎症和溃疡。二者能抑制结肠组织NF-κBP65表达,从而影响TNF-α、IL-6、IL-18促炎细胞因子水平,使其表达降低,促进结肠组织抑炎细胞因子IL-4、IL-10表达,下调炎症反应。二者还能有效改善UC小鼠的血液高凝状态,改善微循环。