不同品系甜叶菊中甜菊糖苷和绿原酸类物质含量测定与分析

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甜叶菊是一种含有甜菊糖苷、绿原酸类物质等多种功能性成分的资源型植物,近年来备受关注。本文分别建立优化了甜叶菊中甜菊糖苷和绿原酸类物质的提取、纯化以及HPLC测定方法,并对14个扦插培育的甜叶菊品系中甜菊糖苷和绿原酸类物质进行含量测定与分析,以期为实际应用中选择适宜的甜叶菊品种进行产品开发利用提供借鉴和指导。甜菊糖昔为甜叶菊中的主要功能性成分,是一类具有高甜度、低热量特性的天然甜味剂。不同种类甜菊糖苷甜度味质不同,其中RD、RA甜味品质较好,甜叶菊原料中RD、RA的含量比例高低可作为衡量甜叶菊品质的主要指标之一。本文采用超声波辅助提取,筛选70%乙醇为溶媒、固相萃取(SPE)对甜叶菊叶中甜菊糖苷进行提取纯化;通过对比分析C18、HSST3、Amide三种不同色谱柱的分离效果,建立并优化以HSST3色谱柱为固定相可同时测定甜叶菊中RA、ST、RF、RC、RBS、RB、SB七种甜菊糖昔、以Amide色谱柱为固定相测定甜叶菊中RD的HPLC方法。含量分析结果表明不同品系甜叶菊中各种甜菊糖苷的含量及组成比例不同,14个扦插培育的甜叶菊品系中以编号1、10中RA+RD组成比例高,依次为73.95%、73.69%,其中RA占比为66.58%、63.92%,RD占比为7.37%、9.77%,提示以这两个品系为原材料可获得甜味品质较好的甜菊糖苷产品;编号2中RD含量及组成比例高,RD占比为16.45%,提示以该品系为原材料可获取高含量的RD;编号13、7、5、3中甜菊糖苷总量及RA组成比例高,提示这些品系富含RA且甜菊糖苷产量高。绿原酸类物质是一类具有抗氧化、抗炎、抗病毒、抑菌等多种功效的天然活性成分,但目前主要从金银花、杜仲、咖啡豆等植物中获取,原材料来源有限。本文以正交法优化确立甜叶菊中绿原酸类物质的超声提取条件为60%乙醇、料液比1:50(g:mL)、温度60℃、提取时间25 min,从8种大孔吸附树脂中选择并优化XAD-16对样品进行纯化前处理(样品溶液浓度1.20 mg/mL、样品溶液pH 3、解析液乙醇浓度70%),经HPLC分析测定表明14个扦插培育的甜叶菊品系中异绿原酸A含量为20.55~54.3 mg/g、绿原酸含量为17.96~32.93 mg/g、异绿原酸C含量为4.15~19.49mg/g、新原酸含量为0.61~4.61 mg/g、隐绿原酸含量为0.52~3.11mg/g、异绿原酸B含量为0.0~3.17mg/g,6种绿原酸类成分总量为43.9~97.8mg/g,可见,不同品系甜叶菊中绿原酸类成分含量有明显差异,编号1中绿原酸类成分含量达97.8 mg/g,提示富含绿原酸类成分的甜叶菊品系可作为获取绿原酸类物质的原材料来源之一。本文所建立的提取、纯化及HPLC方法可用于甜叶菊中甜菊糖苷和绿原酸类物质的分析研究,含量分析结果可为实际应用中选择适宜甜叶菊品种进行产品开发利用提供参考依据。
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