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本研究的目的是探讨survivin在人大细胞多药耐药株H460/cDDP与敏感株H460之间的表达差异,通过siRNA抑制survivin表达逆转耐药株H460/cDDP对DDP、Taxol的耐药性,从而探讨survivin表达对H460/cDDP的耐药性所发挥的作用。
[材料与方法]
采用RT-PCR、Westernblotting法分别检测耐药株H460/cDDP与敏感株H460的survivin表达。靶向survivinsiRNA经脂质体介导转染入耐药株H460/cDDP,并用Westernblotting法检测Survivin蛋白质表达的变化。靶向survivinsiRNA作用于耐药株H460/cDDP后,用MTT法分别检测Taxol、DDP对耐药株H460/cDDP的细胞毒作用,计算抑制50%细胞生长时的药物浓度(IC50值)。
[结果]
耐药株H460/cDDP的survivinmRNA和Survivin蛋白质表达均明显高于敏感株H460(1.095±0.1978vs.0.132±0.0256,P<0.0001;0.295±0.0570vs.0.105±0.0177,P<0.0001)。靶向survivinsiRNA转染耐药株H460/cDDP后,Survivin蛋白质明显下调,其中survivinsiRNA作用72hr抑制率为92.3%,效果最佳。单用Taxol、DDP作用于耐药株H460/cDDP,其IC50值分别为13.14±1.635、6.72±0.732tg/ml,survivinsiRNA作用于耐药株H460/cDDP后,使其TaxolIC50值减少35.70%(8.51±0.935μg/ml,P=0.006),但DDPIC50值的变化没有统计学意义(6.84±0.660μg/ml,P=0.605)。
[结论]
人大细胞肺癌多药耐药株H460/cDDP的survivin表达高于敏感株H460,靶向survivinsiRNA可以有效抑制耐药株H460/cDDP的survivin表达,并且提高H460/cDDP对Taxol的敏感性,但对H460/cDDP的DDP敏感性没有影响,表明survivin高表达对H460/cDDP的多药耐药性起作用,但H460/cDDP还存在其他耐药分子机制。