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本试验以‘红双喜’月季(Rosa chinensis‘Double Delight’)当年生枝条(茎段、叶片、叶柄)、花蕾(花瓣、花丝)为试验材料,利用植物组织培养技术,采用正交设计和响应面设计等试验方法,对其初代培养、继代增殖、生根培养、炼苗与移栽的各培养阶段主要影响因素进行研究,建立了‘红双喜’月季离体快繁技术体系,该技术体系可为其大规模生产提供理论依据和技术指导;利用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用法对‘红双喜’月季茎段、叶片以及花蕾期花瓣和盛开期花瓣所含挥发油成分进行提取鉴定,明确了挥发性物质的种类及含量,旨在开发该植物的潜在价值,为其在其它方面的研究及综合开发利用奠定基础和提供理论依据。主要结果如下:1.初代培养阶段(1)外植体消毒:茎段最佳消毒处理为75%C2H5OH 30 s+0.1%HgCl2 6 min,成活率为97.78%;叶片、叶柄最佳消毒处理为75%C2H5OH 45 s+0.1%HgCl2 5 min,成活率分别为84.45%、85.56%;花瓣、花丝最佳消毒处理为75%C2H5OH 30 s+0.1%HgCl2 7 min,成活率分别为97.78%、100%。(2)不定芽诱导:以带芽点茎段为试验材料,其最佳诱导培养基为MS+3.00 mg·L-16-BA+0.30 mg·L-11 NAA,诱导率为95.56%。(3)愈伤组织诱导:茎段节间、母株叶片、叶柄、组培苗叶片、花瓣、花丝均可诱导出愈伤组织,其中以母株叶片为愈伤组织诱导最佳外植体,最佳诱导培养基为MS+1.79mg·L-1 2,4-D+2.12 mg·L-1 NAA+0.15 mg·L-1 KT,诱导率为93.33%。2.继代增殖培养阶段(1)不定芽增殖:MS+1.00 mg·L-11 6-BA+0.10 mg·L-1 IBA为不定芽最佳增殖培养基,30 g·L-1蔗糖为最佳碳源使用浓度,培养40 d为最佳继代培养周期,增殖系数可达6.89。组培苗长势良好,叶片呈翠绿色。(2)愈伤组织分化:最佳愈伤组织分化培养基为MS+2.00 mg·L-1 6-BA+0.20 mg·L-1IBA+0.20 mg·L-1 GA3,愈伤组织分化率为43.20%。3.生根培养阶段(1)瓶内生根:瓶内生根为最佳生根方式,其最适培养基为1/4MS+0.05 mg·L-1IBA+2.50 g·L-1活性炭(Ac),生根率为95.56%,不定根多为白色,根长5.3 cm左右。(2)瓶外生根:将组培苗在室内炼苗3 d,扦插在混有生根营养液(1/6MS+0.05mg·L-11 IBA+0.15 mg·L-11 NAA)的基质中(V细沙:V蛭石:V珍珠岩=1:1:1),同时空气湿度保持在90%,瓶外生根率可达88.89%。4.炼苗移栽阶段组培苗移栽前最佳炼苗时间为5 d,最适移栽基质为V细沙:V蛭石:V珍珠岩:V椰糠=1:2:3:1,移栽成活率为96.67%。5.挥发油成分分析:(1)顶空固相微萃取头筛选:在萃取成分数量及相对含量上,最适‘红双喜’月季挥发油提取的顶空固相微萃取头为85μm CAR/PDMS。(2)GC-MS分析:在盛开期花瓣、花蕾期花瓣、叶片和茎段中共检测到萜烯类、醇类、芳香烃类、酯类、醛类等12类126种挥发性成分,均以醇类化合物相对含量最高,分别为36.78%、36.36%、48.90%、39.43%。盛开期花瓣中有12类62种挥发性物质,苯乙醇(29.97%)为其主要香气成分;花蕾期花瓣中有11类68种挥发性物质,主要香气成分为3,5-二甲氧基甲苯(22.24%)和苯乙醇(21.14%);叶片中有11类52种成分,其中以芳樟醇(46.08%)为主要挥发性物质;茎段中有8类28种成分,主要挥发性物质为1-壬醇(37.62%)。