电针百会、神庭改善缺血再灌注大鼠学习记忆的小动物影像学研究

来源 :福建中医药大学 | 被引量 : 14次 | 上传用户:binhaiwz_2009
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目的:以大脑缺血再灌注(MCAO)模型大鼠,通过电针干预,检测大鼠行为学、脑血流、脑葡萄糖代谢情况,探讨电针百会、神庭改善MCAO大鼠学习记忆的行为学、影像学空间结构、血流、葡萄糖代谢变化情况及可能的作用机制。方法:用雄性Sprague-Dawley大鼠80只,随机分为假手术组(20只)和造模组(60只)。造模组采用线栓法制备缺血再灌注(MCAO)大鼠模型,进而随机分为模型组、电针组、非穴组(每组各20只)。电针组和非穴组大鼠于手术后24小时开始干预,电针组取穴百会、神庭,非穴组取双侧胁下非经非穴地方,采用疏密波,频率1-20HZ,30min/次,1次/日,共干预7天。假手术组及模型组大鼠以等同于干预条件的抓取和固定30min,不予电针刺激。各组大鼠于造模后24小时、3天、5天、7天,分别采用Zealonga方法评分,观察大鼠神经功能缺损情况;造模后第3天开始,运用Morris水迷宫检测MCAO大鼠学习记忆能力,连续检测4天;并在针刺干预第7天后行小动物磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)观察脑梗死体积;在大鼠尾静脉注射"钆喷酸葡胺注射液",以灌流加权成像(Perfusion weighted imaging,PWI)系列检测脑血流(Cerebral blood flow,CBF)、脑血容积(Cerebral blood volume,CBV)及血流平均通过时间(Mean transit time,MTT),观察针刺百会、神庭后MCAO大鼠海马缺血核心区、周围区和未损伤区脑血流情况;并在针刺干预后第7天(即小动物MRI扫描后)行尾静脉注射18F-FDG,以小动物正电子发射型计算机断层显像仪(Positron Emission Computed Tomography,PET)检测脑葡萄糖代谢情况,研究针刺百会、神庭后改善MCAO大鼠学习记忆相关脑区的葡萄糖代谢变化情况。结果:1.神经行为学评分:电针组大鼠第3天、第5天、第7天行为学分值减少,较模型组及非穴组低,电针组神经行为学评分优于模型组、非穴组,差异显著;非穴组各时间点行为学评分与模型组比较无明显差异,表明电针百会、神庭穴可以改善MCAO大鼠的神经功能缺损的症状。2.水迷宫实验:定向航行实验显示:模型组大鼠第3天、第4天、第5天、第6天平均逃避潜伏期延长;而电针组逃避潜伏期缩短,与模型组比较差异明显。空间探索实验显示,模型组大鼠穿越平台次数明显减少;而电针组大鼠穿过平台次数增加,较模型组、非穴组多,表明电针百会、神庭穴可以改善MCAO大鼠的空间学习记忆能力。3.脑梗死体积:小动物磁共振T2结构像显示,模型组大鼠脑梗死体积范围较大,波及额叶皮质及对侧海马区,水肿明显;电针组大鼠脑梗死体积百分比明显小于模型组和非穴组,水肿较轻;而非穴组梗死体积百分比较模型组缩小,但无明显差异。表明电针百会、神庭穴可以减小MCAO大鼠脑梗死体积并减轻脑水肿。4.脑血流变化:CBF值:假手术组脑皮质及海马区血流速度值略有降低,但降低幅度较小。模型组、电针组、非穴组各组大鼠皮质区及海马区脑血流速度均有明显降低,尤其以模型组降低最大,与假手术组、电针组、非穴组比较有明显差异。电针百会、神庭后脑皮质及海马区脑血流速度有明显增加,与模型组比较有明显差异;电针组脑血流速度较非穴组高,但无明显差异。CBV值:假手术组脑皮质及海马区血流容量值有降低,降低幅度较小。模型组、电针组、非穴组各组大鼠皮质区及海马区脑血流容量均有明显降低,尤其以模型组降低最大,与假手术组、电针组、非穴组比较有明显差异。电针百会、神庭后脑皮质及海马区脑血流容量有明显增加,与模型组、非穴组比较有明显差异。MTT:假手术组MTT值较模型组及非穴组高,但与电针组比较,无显著差异;电针组较模型组高。表明电针能改善MCAO大鼠局部脑血流的流速(CBF)、血容积(CBV)、平均通过时间(MTT)。5.葡萄糖代谢变化:小动物PET显示,电针组大鼠杏仁核、尾状壳核、前扣带回、内嗅皮层、前岛叶、内侧前额叶、眶额叶皮层、后扣带回、前背侧海马、背侧海马等与认知相关脑区,葡萄糖代谢明显高于模型组和非穴组大鼠,表明电针百会、神庭穴可以改善MCAO大鼠与认知相关脑区在葡萄糖代谢。而可能与认知相关的运动皮质、副皮质、下丘脑、小脑白质、小脑灰质、上丘、下丘、全丘、额叶联合皮质、垂体等脑区,电针组葡萄糖摄取率明显较模型组高,表明电针同时改善了与认知间接相关的其他脑区葡萄糖代谢。结论:1.电针百会、神庭可以改善MCAO大鼠神经行为学,并提高其空间和位置记忆能力,有一定的累加作用。2.电针百会、神庭可以减少MCAO大鼠脑梗死体积,减轻脑内神经元细胞水肿,进而保护与学习记忆相关的神经细胞的功能,并促进其他神经细胞的协调恢复。3.电针百会、神庭可以增加MCAO大鼠缺血周围区的血流速度、血容积及血流平均通过时间,有利于减轻脑缺血再灌注后脑皮质及海马区损伤,以改善MCAO大鼠神经细胞缺血缺氧状态,促进缺血组织的修复。4.电针百会、神庭可以改善MCAO大鼠认知相关脑区(内侧前额叶、前背侧海马、背侧海马等)葡萄糖代谢;同时电针可能激活了与认知间接相关脑区的葡萄糖代谢,共同促进神经细胞正常能量转换,以正常发挥学习记忆相应功能。从分子影像学水平阐述针刺改善MCAO大鼠学习记忆的作用机制。
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