香菇酚类物质的提取及功能学特性的研究

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香菇[Lentimus edodel(Berk)Singer]为担子菌纲伞形科真菌,是一种重要的食药兼用的菌物,被誉为菇中皇后。香菇的某些成分具有很高的药用价值,是科学界重点研究的抗癌植物之一。本项目研究了香菇酚类物质的提取工艺及其抗氧化抑菌活性,并采用高效液相色谱法分析了香菇酚类物质的成分,研究成果为进一步开发和利用香菇资源提供科学依据。(1)溶剂法提取香菇酚类物质的研究:以干香菇为原料,考察提取温度、溶剂浓度、料液比、提取时间对酚类物质提取率的影响;在单因素实验的基础上,设计正交试验确定了乙醇提取香菇酚类物质的最佳工艺条件为:提取溶剂为70%的乙醇溶液,1:20的料液比,在50℃水浴中浸提1.5h,香菇酚类物质提取率为3.07mg/g;研究超声辅助提取香菇酚类物质的可行性,通过响应面分析得出超声波辅助提取的最佳工艺条件为70%乙醇溶液,超声功率80W下超声12min,酚类物质提取率为3.35mg/g。(2)运用超临界萃取技术,研究超临界提取香菇酚类物质的最佳工艺。考察萃取压力、萃取温度、流量、夹带剂用量对提取率的影响。在单因素实验的基础上,通过正交试验确定超临界萃取香菇酚类物质的最佳工艺条件为:以70%乙醇作夹带剂,萃取温度70℃、萃取压力35MPa、CO2流量为20L/h、夹带剂用量100mL、萃取时间1h,香菇酚类物质提取率为2.03mg/g。超临界萃取能得到较纯的香菇酚类物质。(3)采用Fenton反应和邻苯三多酚自氧化法研究了香菇酚类物质对·OH和对·O2-的清除作用并与Vc作对比。结果显示:在一定浓度范围内,香菇酚类物质对·OH和·O2-具有一定的清除能力;香菇酚类物质对·OH和·O2-的清除能力总体弱于Vc;但低浓度的香菇酚类物质对羟自由基的清除能力比Vc高。香菇酚类物质抗油脂自动氧化能力研究显示:香菇酚类物质具有较强的抗油脂氧化活性。(4)以茶多酚为对照,研究了香菇酚类物质的抑菌作用。结果表明:香菇酚类物质无法抑制绿木霉和黑霉两种真菌的生长,但对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、和沙门氏菌四种细菌均有抑制作用;长时间低温贮藏可以较好的保持香菇酚类物质的抑菌活性,高温处理对香菇酚类物质抑菌活性有一定影响;在pH6-8值范围内,香菇酚类物质的抑菌活性受pH值改变的影响不大。香菇酚类物质对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的最低抑菌浓度分别为8mg/mL和5mg/mL,对大肠杆菌和沙门氏菌的最低抑菌浓度分别为4mg/mL和9mg/mL。(5)采用高效液相色谱法对香菇酚类物质的成分进行了研究。色谱仪为岛津LC-20A,色谱条件为柱温30℃,反相C18柱,运行30min,流速1mL/min,检测波长310nm下,进行甲醇—水等梯度洗脱,可较好地分析香菇酚类物质中的各成分并从中分离出绿原酸。
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