[目的]探究置入Cu-IUD后子宫内膜组织中microRNA的表达变化,并初步探索microRNA调控Cu-IUD致异常子宫出血的机制。[方法]收集置入Cu-IUD之前和取出Cu-IUD之前的人子宫内膜组织,提取其RNA并进行microRNA测序,并采用RT-qPCR进行验证。然后将验证过的microRNA进行生物信息学的分析,筛选出与子宫内膜的损伤和增殖相关的microRNA以及预测microRNA的靶基因,并用双荧光素酶进行验证。检测验证过的靶基因以及其相关的上、下游基因的蛋白表达水平。采用含铜培养基培养人子宫内膜上皮细胞（Human endometrial epithelial cells,HEEC）来模拟宫腔内置入Cu-IUD。Tunel试验和细胞划痕试验检测Cu2+对子宫内膜上皮细胞的细胞增殖和细胞凋亡的影响。用RT-qPCR验证用Cu2+处理子宫内膜上皮细胞后是否存在microRNA的差异表达。然后检测与子宫内膜损伤和修复相关基因的表达水平。使用miRNA的激活剂和抑制剂去处理细胞后,检测miRNA的靶基因的蛋白表达水平,通过miRNA、siRNA以及相关抑制剂来降低靶基因的表达后再去检测其下游基因的表达水平,采用细胞划痕试验检测Cu2+以及相关激素对子宫内膜上皮细胞的细胞增殖的影响。[结果]microRNA的测序结果表明,与对照组相比在置入了 Cu-IUD的子宫内膜组织中有46个上调的microRNA和26个下调的microRNA。差异最显著的前10个microRNA的RT-qPCR结果显示Cu-IUD组中有4种miRNA显著上调,2个miRNA显著下调。差异性上调的miR-144-3p的靶基因包括金属硫蛋白（metallothionein,MT）和血小板反应蛋白-1（Thrombospondin-1,THBS-1）,并使用双荧光素酶基因报告对其进行了验证。在置入了 Cu-IUD的子宫内膜组织中MT、核因子κB（Nuclear factor κB,NFκB）、基质金属蛋白酶（Matrix metalloproteinase,MMP）和 THBS-1、转录生长因子-β3（Transcription growth factor-β,TGF-β3）、SMAD3的mRNA和蛋白表达水平均显著低于对照组。6×10-5 mol/1（10 μg/ml）Cu2+会导致HEEC的细胞凋亡增加以及细胞增殖能力减弱。和对照组比较,用6×10-5 mol/l Cu2+处理HEEC 48 h后有6种microRNA显著上调（miR-205-5p,miR-29b-3p,miR-486-5p,miR-144-3p,miR-106a-5p,novel-234）。和对照组比较,用6×10-5mol/l Cu2+处理HEEC 48 h后,miR-144-3p的靶基因MT和THBS-1及其下游相关基因P-NFκB、MMP9、TGF-β3、P-SMAD3的表达均显著降低。在6×10-5 mol/l Cu2+浓度下miR-144-3p能调控MT和THBS-1的表达。和对照组比较,miRNA和siRNA转染细胞后,降低了靶基因MT或THBS-1的表达,同时P-NFκB、TGF-β3的表达也显著降低。与只用Cu2+处理细胞比较,用NFκB或TGF-β3的抑制剂和Cu2+同时处理细胞后,MMP9或P-SMAD3的表达均显著降低;用MMP9或SMAD3的抑制剂和Cu2+同时处理细胞后,细胞的增殖能力显著降低。[结论]置入Cu-IUD后子宫内膜组织会出现microRNA的差异性表达,miR-144-3p为其上调的microRNA之一。置入Cu-IUD后宫腔内释放的大量Cu2+会导致子宫内膜中miR-144-3p的上调,使靶基因MT的表达下调,进而下调NFκB/MMP9（损伤通路）的表达,导致子宫内膜细胞损伤加重;另外,其靶基因THBS-1的表达也被下调,进而降低TGF-β3/SMAD3（修复通路）的表达,导致子宫内膜的细胞增殖能力减弱,最终导致异常子宫出血。