玉米双隐性opaque2-waxy基因种质创制与互作机理研究

来源 :中国农业科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuchen2007
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糯玉米起源于中国,因其口感软糯香甜,适口性好,是深受我国人民喜爱的鲜食健康食品。糯玉米胚乳中所含淀粉大部分为支链淀粉,在纺织业、造纸业、酿造业、饲料养殖业等行业领域作为重要的原料,具有很高的经济价值。但是糯玉米的营养价值并不完全,尤其是缺少赖氨酸、色氨酸等必需氨基酸,不能满足人类食用以及畜禽养殖对营养的需求,因而提高糯玉米胚乳中赖氨酸含量对完善糯玉米的营养品质、提高糯玉米的食用价值和商品价值具有重要的意义。将opaque2突变基因导入糯玉米自交系,可以大幅提高籽粒中赖氨酸含量,但同时导致籽粒变为粉质型,阻碍了其在生产中的应用。本研究通过将含有胚乳修饰基因的优质蛋白玉米(QPM)的opaque2基因导入糯玉米自交系中,构建了多套opaque2-waxy双隐性近等基因系(o2w2-NIL),并对o2w2-NIL及其供受体亲本进行了一系列形态、品质、亚显微结构以及蛋白表达水平的比较分析,初步判断opaque2对不同糯玉米的影响差异,为利用opaque2对糯玉米进行品质改良提供理论依据。本论文的研究结果主要有以下几方面:1.利用回交技术和分子标记辅助选择,构建了多套o2w2-NIL,并检测了5套o2w2-NIL及其供受体亲本籽粒中赖氨酸含量,近等基因系中97-7/o2o2、中63-2/o2o2、赵OP-6/o2o2、300父本/o2o2、中501/o2o2的赖氨酸含量分别提高了59.0%、52.7%、48.5%、46.3%和61.9%。2.将构建成功的5套o2w2-NIL连续繁育3代,并考察其稳定性,证明这5套o2w2-NIL都能够稳定遗传,Bg-rbg转座子系统没有影响其稳定性。3.将o2w2-NIL中97-7/o2o2、中63-2/o2o2、赵OP-6/o2o2、300父本/o2o2、中501/o2o2与其供受体亲本进行比较分析,发现在水分、粗脂肪、粗蛋白、粗淀粉、氨基酸总量和17种氨基酸组成等营养成分方面有不同差异,支链淀粉含量和非醇溶蛋白含量显著增加。4.用扫描电镜和透射电镜观察近等基因系中97-7/o2o2、中63-2/o2o2和300父本/o2o2及其供受体亲本的胚乳亚显微结构,比较发现胚乳细胞中淀粉粒、蛋白体等结构的形状、大小、分布密度等均有较大差异,亚显微结构与籽粒表型有一定相关性。5.o2突变基因的导入使O2蛋白的表达受到明显抑制,糯玉米中WX蛋白的表达量也很低。取近等基因系中97-7/o2o2、中63-2/o2o2和300父本/o2o2及其供受体亲本授粉后10天、14天、18天、22天、26天的胚乳,利用荧光定量研究发现O2和WX蛋白的表达量随时间呈现先升高后下降的趋势。6.利用酵母单杂交技术证明O2转录因子对WX和wx基因没有直接相互作用,推测O2与WX可能通过调控GBSSⅠ等淀粉合成过程中关键酶的合成起到间接的相互作用。
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