急性心肌缺血后HFABP、Tn-T、caspase3及RIP3在心肌中的表达研究

来源 :宁夏医科大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:xuanxuaner8
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目的:本研究探讨急性心肌缺血后HFABP、Tn-T、caspase3及RIP3在心肌中表达情况的改变,以证实联合检测上述因子是否对急性心肌梗死后的诊断有价值。方法:本研究分为两部分,第一部分,结扎大鼠冠脉左前降支制作急性心肌缺血模型,分为(1)对照组,(2)假手术组,(3)15min组,(4)30min组,(5)1h组,(6)3h组,(7)6h组,(8)9h组,使用心电图确定模型成功,心肌取材后,对大鼠心肌行TTC,HE染色,应用免疫组织化学及免疫荧光技术观察HFABP、Tn-T、caspase3及RIP3因子在心肌中的表达情况,并应用western-blotting技术对其进行定量分析,使用ELISA技术对大鼠心肌梗死后血液中HFABP、Tn-T含量进行分析,并利用电镜技术观察大鼠心梗后心肌细胞形态学的微观改变;第二部分,选取宁夏医科大学病理系2007年至2016年30例心肌组织标本,分为(1)对照组,(2)冠脉狭窄组,(3)心肌梗死组,对选取的标本进行HE染色,观察冠脉狭窄程度及其相应心肌的改变,并应用免疫组织化学染色观察HFABP、Tn-T、caspase3及RIP3因子在心肌中表达改变情况。结果:第一部分实验,(1)心电图所示,手术成功后心电图S-T段呈弓背状抬高,(2)TTC染色所示,梗死区心肌苍白,非梗死区心肌呈砖红色,(3)HE染色所示,缺血后心肌细胞排列紊乱,胞质水肿,淡染,心肌横纹消失,核固缩凝集、深染,并有炎细胞局灶浸润,并可发现心肌波浪状改变,部分心肌有断裂,(4)免疫组织化学及免疫荧光染色所示,结扎大鼠冠脉左前降支15min后缺血心肌HFABP、Tn-T即可出现斑片状缺失,随着缺血时间延长,HFABP、Tn-T明显缺失,而caspase3、RIP3表达有升高,(相对于对照组,p<0.05)(5)western-blotting检测大鼠心肌HFABP、Tn-T、caspase3及RIP3所示,随着缺血时间延长,HFABP、Tn-T含量减少,caspase3、RIP3含量增多(相对于对照组,p<0.05),(6)使用ELISA技术检测大鼠心肌梗死后血液中HFABP、Tn-T含量表明,血液中HFABP、Tn-T随缺血时间延长,含量升高(相对于对照组,p<0.05),(7)电镜观察心梗后心肌形态微观改变可见,线粒体疏松,变性,肿胀,呈空泡状,内可见线粒体嵴溶解、断裂;第二部分实验,(1)HE染色所示,冠脉狭窄组与心肌梗死组可见冠脉管腔明显狭窄,心肌梗死组心肌中可见大量中性粒细胞浸润,(2)免疫组化学染色所示,HFABP、Tn-T在对照组表达强烈,在冠脉狭窄组与心肌梗死组表达减弱或缺失,caspase3、RIP3在对照组表达弱,在冠脉狭窄组与心肌梗死组表达增强(p<0.05)。结论:HFABP、Tn-T、caspase3及RIP3在早期急性心肌梗死中表达有改变,联合检测这些因子对急性心肌梗死的早期诊断有一定的价值。
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