针刺对神经生长因子在脊髓及备用背根节内表达影响的初步研究

来源 :南华大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:green7116xxxx
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目的:探讨部分去背根及针刺后不同时相脊髓和背根节(DRG)神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的表达变化,藉以了解针刺后脊髓和背根节内NGF表达变化与脊髓可塑性的关系。方法:将20只成年健康猫和20只SD大鼠建立双侧部分去背根模型,并分别随机分为正常对照组,双侧部分背根切断3天、7天及14天组,每组5只。模型建立按照文献操作[7],2%戊巴比妥钠(2.6mg /k g)腹膜腔注射麻醉后行双侧备用根手术,即猫:切除双侧L1~L5、L7~S2 DRG,保留双侧L6DRG为备用背根;大鼠:切除双侧L1~L4、L6~S2 DRG,保留双侧L5DRG为备用背根。术后随机对一侧L6及L5脊神经外周支分布区的两组穴位(足三里和悬钟、伏兔和三阴交)进行针刺。应用G66805-1A型袖珍穴位诊疗仪(上海华谊医用仪器有限公司),以两根1寸毫针作为正负极电针分别刺入同组穴位中的两穴,针刺30min (频率98次/min,15min后交换电极),次日换另一组穴位,两组穴位交替进行。分别于针刺第3天、7天、14天后取材,将大鼠和猫的脊髓及备用背根节组织分别应用免疫组织化学和Western-blot实验方法检测神经生长因(NGF)蛋白表达变化,应用图象分析系统和凝胶分析系统计算阳性结果相对积分吸光度值。结果:1.(1)免疫组织化学检测NGF在大鼠脊髓和备用DRG组织中的表达,镜下结果显示脊髓后角Ⅱ板层、背核、DRG中均存在数量不等的NGF阳性神经元;其NGF阳性神经元胞浆、胞核均着色,但胞核染色较深;(2)7天、14天组针刺侧备用DRG中NGF蛋白表达的积分光密度值较非针刺侧升高,差异有显著性(P<0.05),且3天、7天、14天组针刺侧备用DRG中NGF蛋白表达的积分光密度值随时间推移依次显著升高(P<0.05),且7天、14天组双侧备用DRG中NGF蛋白表达的积分光密度值均显著高于正常对照组(P<0.05); (3)而脊髓Ⅱ板层、背核中NGF蛋白表达的积分光密度值针刺侧与非针刺侧显著升高,且均高于正常对照组,差异均有显著性(P<0.05),但针刺侧与非针刺侧及各组间无显著性差异(P>0.05)。2. (1) Western-blot检测NGF:在猫脊髓后角和备用DRG组织中存在NGF蛋白的表达;(2)在DRG中:针刺3天组,针刺侧和非针刺侧及正常对照组三者之间NGF蛋白表达量差异无显著性意义(P>0.05);(3)针刺7天组,针刺侧DRG内NGF蛋白表达量显著高于非针刺侧(P<0.05),且高于3天组针刺侧与非针刺侧(P<0.05),而7天组非针刺侧DRG内NGF蛋白表达量高于3天组非针刺侧(P<0.05),且高于正常对照组(P<0.05);(4)针刺14天组,针刺侧DRG内NGF蛋白表达量显著高于非针刺侧(P<0.05),且高于7天组针刺侧与非针刺侧(P<0.05);14天组非针刺侧DRG内NGF蛋白表达量高于7天组非针刺侧(P<0.05),差异有显著性。(5)在脊髓后角中:NGF蛋白表达量在各组中针刺侧与非针刺侧无显著性差异(P>0.05),且组间也无显著性差异(P>0.05),但两侧均高于正常对照组(P<0.05)。结论:1.在脊髓和备用背根节中存在NGF蛋白的表达。2.针刺对脊髓内NGF蛋白的表达无影响。3.针刺促进NGF在备用背根节的表达上调且此效应在14天内随时间推移而加强,可能与脊髓可塑性有关。
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