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【研究目的】本课题主要研究脓毒症小鼠经抗Tim3抗体治疗后，其胸腺、脾脏、肺脏和肝脏组织在免疫与病理水平的变化，研究抗Tim3抗体治疗是否改善脓毒症小鼠的生存率，并探讨其可能机制。【研究方法】1、建立CLP手术致脓毒症小鼠模型，实验对象为12只C57BL/6小鼠，随机分成脓毒症模型组(CLP，n=6)和假手术组(Sham, n=6)。CLP模型建立24h时，流式细胞术检测各组小鼠脾脏组织CD8+T细胞Tim3分子表达水平。2、选择C57BL/6小鼠40只，随机分为假手术组(Sham，n=10)、CLP+腹腔注射生理盐水组(CLP，n=10)、CLP+腹腔注射抗Tim3抗体组（anti-Tim3，n=10)和CLP+腹腔注射同型对照抗体组(Isotype，n=10)。各组术后即刻予腹腔注射生理盐水、抗Tim3抗体或同型对照抗体(均每只50μg/150μl)，记录各组小鼠7d的生存时间及生存率。3、选择C57BL/6小鼠24只，随机分为假手术组(Sham，n=6)、CLP+腹腔注射生理盐水(CLP，n=6)、CLP+腹腔注射抗Tim3抗体组(anti-Tim3，n=6)和CLP+腹腔注射同型对照抗体组(Isotype，n=6)。各组术后即刻予以腹腔注射生理盐水、抗Tim3抗体或同型对照抗体(均每只50μg/150μl)。①术后24h时取各组小鼠外周血，检测小鼠外周血细菌清除率；②术后24h时各组小鼠行腹腔灌洗，取腹腔灌洗液检测细菌清除率。4、选择C57BL/6小鼠24只，随机分为假手术组(Sham，n=6)、CLP+腹腔注射生理盐水(CLP，n=6)、CLP+腹腔注射抗Tim3抗体组(anti-Tim3，n=6)和CLP+腹腔注射同型对照抗体组(Isotype，n=6)。各组术后即刻给予生理盐水、抗Tim3抗体或同型对照抗体(均每只50μg/150μl)。①术后24h时，取各组小鼠肺组织、肝脏组织，进行病理学检验；②术后24h时，取各组小鼠胸腺组织、脾脏组织，进行TUNEL染色病理检验，同时进行阳性率分析；③术后24h时，取各组小鼠脾脏组织，流式细胞仪检测T淋巴细胞凋亡；④术后24h时，取各组小鼠外周血，ELISA法检测细胞因子TNF-α、IL-10、IL-6和IFN-γ水平；⑤术后24h时，各组小鼠行腹腔灌洗，流式细胞仪检测腹腔灌洗液内中性粒细胞数量检测。【结果】1、建立CLP模型术后24h时，脓毒症模型组小鼠脾脏淋巴细胞特别是CD8+T细胞上Tim3分子表达水平显著高于Sham组（P值均小于0.01）。2、建立CLP模型术后立刻腹腔给予anti-Tim3组小鼠抗Tim3抗体，CLP组小鼠腹腔注射生理盐水，Isotype组小鼠腹腔注射同型对照抗体，结果表明anti-Tim3组小鼠生存时间及生存率显著高于Isotype组和CLP组（P值小于0.01）。3、建立CLP模型术后立刻腹腔给予anti-Tim3组小鼠抗Tim3抗体，CLP组小鼠腹腔注射生理盐水，Isotype组小鼠腹腔注射同型对照抗体。①24h时anti-Tim3组小鼠外周血检测细菌清除率显著高于CLP组和Isotype组（P值小于0.01）；②24h时anti-Tim3组小鼠腹腔灌洗液细菌清除率显著高于CLP组和Isotype组（P值小于0.01）。4、建立CLP模型术后立刻腹腔给予anti-Tim3组小鼠抗Tim3抗体，CLP组小鼠腹腔注射生理盐水，Isotype组小鼠腹腔注射同型对照抗体。①24h时anti-Tim3组小鼠肺组织、肝组织病理损伤程度显著轻于Isotype组和CLP组（P值小于0.01）；②24h时小鼠胸腺、脾脏组织TUNEL染色显示anti-Tim3组细胞凋亡显著少于CLP组和Isotype组，染色阳性的细胞比例也显著降低（P值小于0.01）；③24h时anti-Tim3组胸腺、脾脏组织细胞凋亡显著少于CLP组和Isotype组（P值小于0.01）；④24h时anti-Tim3组小鼠外周血细胞因子TNF-α、IL-6和IFN-γ的水平显著低于CLP组和Isotype组。anti-Tim3组小鼠外周血IL-10水平显著高于CLP组和Isotype组（P值小于0.01）；⑤24h时anti-Tim3组小鼠腹腔灌洗液中性粒细胞数量显著高于CLP组和Isotype组（P值小于0.01）。【结论】脓毒症小鼠脾脏CD8+T细胞Tim3分子表达显著增加，抗Tim3抗体可改善脓毒症小鼠7d生存率。抗Tim-3抗体对脓毒症小鼠的保护作用可能与其改善脓毒症小鼠肝脏、肺脏病理损伤程度，抑制脓毒症小鼠胸腺和脾脏细胞凋亡，提高腹腔和血液细菌清除率，以及调节腹腔机体免疫功能中性粒细胞数量相关。