目前药学的研究的前沿热点之一就是:认识靶点并寻找有效的载体把药物传送到靶点。人们希望新载体不仅具有靶向识别能力,而且具有细胞穿透性能。配体。受体介导的靶向给药系统备受关注。受体介导的细胞内吞可被利用来降低抗肿瘤药物的毒性及增加其跨细胞转运。转铁蛋白和转铁蛋白受体介导的内吞作用是细胞最具特点的转运过程之一。由于转铁蛋白受体(TfR)在肿瘤细胞表面过度表达,已有研究将转铁蛋白作为配体-受体介导药物传递系统的载体来治疗癌症。　　 替拉扎明(TPZ)是一种抗肿瘤的生物还原剂,目前正处于临床研究阶段。该药在肿瘤组织乏氧细胞内生成自由基来损伤DNA,从而产生细胞毒效应,能显著增加放射治疗的抗肿瘤作用,且与络铂类药物和紫杉烷类药物并用具有高度协同作用,临床前景看好。但其毒副作用不容忽视,可能是其迟迟不能获准上市的主要原因。　　 为了提高替拉扎明对肿瘤治疗的靶向性,从而减少给药剂量,降低毒副作用,本研究将转铁蛋白与替拉扎明共价结合,并对载药蛋白的体内外活性进行了研究。　　 由于商品化的人血清转铁蛋白价格昂贵,本研究通过从血清中提取来获得蛋白载体,并建立一套简单可行的工艺。由于人血浆很难得到,而猪血清廉价易得,本研究分别提取了人血浆转铁蛋白和猪血清转铁蛋白,通过较全面地研究其性质,并与Sigma公司的人血清转铁蛋白相比较,证明猪血清转铁蛋白与人源转铁蛋白相比,其理化性质有很大的相似性,所以本研究中利用猪血清转铁蛋白制备药物结合物。　　 在获得大量载体的基础上,用活泼酯法,成功地将小分子的生物还原剂替拉扎明通过一个戊二酸的衍生物连接,共价结合到蛋白载体中赖氨酸残基的ε-氨基上,并纯化获得了转铁蛋白-替拉扎明结合物(Tf-G-TPZ),平均结合比为5.1。通过紫外光谱,SDS-PAGE,MALDI-TOF,高压液相色谱等方法比较全面地研究了载药蛋白的特征。载药蛋白的药物体外释放行为初步证明了实验设计的正确性,即结合物在中性条件下相对稳定,而在酸性条件下能够加快释放药物。　　 利用MTT法在乏氧条件下考察了Tf-G-TPZ对高表达TfR的细胞株HepG2、KB、KBV以及TfR阴性的外周血淋巴细胞PBMC的体外细胞毒试验。在小鼠体内建立S180肉瘤肿瘤模型,研究了TPZ和Tf-G-TPZ静脉注射后不同时间点在小鼠体内的药物分布,证实TPZ与蛋白连接后,能有效地增加其在肿瘤组织内的蓄积。进一步通过对注射用药后的抑瘤作用,动物体重变化,组织切片等初步研究了Tf-G-TPZ的药效及对动物的一般毒性考察等,得出结论我们所制备的抗肿瘤结合物Tf-G-TPZ能够提高药效,同时未带来明显的系统毒性,初步表明该载药蛋白结合物对肿瘤细胞具有良好的靶向作用,为该结合物进一步深入研究奠定了较好的基础。