【摘 要】
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第一部分:人甲状旁腺素1-34肽的制备.第一章:人甲状旁腺素1-34肽的化学合成.目的:以wang树脂为载体,应用Fmoc/tBu方法合成人甲状旁腺素.结论:该工艺简单,易于扩大,适合于规模化生
【出 处】
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中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院
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第一部分:人甲状旁腺素1-34肽的制备.第一章:人甲状旁腺素1-34肽的化学合成.目的:以wang树脂为载体,应用Fmoc/tBu方法合成人甲状旁腺素.结论:该工艺简单,易于扩大,适合于规模化生产.第二章:人甲状旁腺素1-34肽的基因工程表达;采用全基因分段合成和补丁连接相结合的方法构建了人甲状旁腺素(hPTH)(1-34)肽基因,并利用GST融合表达系统,在大肠杆菌中克隆和可溶性表达了hPTH(1-34)肽基因.兔肾皮质细胞测活表明.重组产物与化学合成人甲状旁腺素(1-34)肽具有相近的腺苷酸环化酶激活活性;第二部分:人胸腺素α1的制备及其与人干扰素α-1b的融合表达研究;第一章:人胸腺素α1的化学合成;该文以Fmoc保护氨基酸和wang树脂为原料,TBTU-HoBt为缩合剂.采用固相多肽合成方法制备胸腺素α1.为TFA切肽后,产品的平均总收率可达13﹪以上.该工艺简单,易于扩大,适合于规模化生产;第二章:人胸腺素α1在大肠杆菌中的融合表达;利用基因工程表达的方法,在大肠杆菌中通过融合方式高效表达了胸腺素α1前体基因,随后经亲和层析和SP强阳离子树脂纯化相结合的方式,得到了胸腺素前体肽段31肽和N-端未经乙酰化的28肽.第三章:人胸腺素α1与人干扰素α-1b的融合表达研究.为了构建人胸腺素α1与干扰素α1-b的融合蛋白(TA1-IFN),以获得高活性免疫功能的新型基因工程药物.该文采用了3’-末端互补高温聚和酶延伸与PCR相结合的方法.人工合成了TA1-IFN融合基因.
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