据世界卫生组织统计，全世界约有3.5亿的乙型肝炎病毒(HBV)携带者，每年至少有120万感染患者死于HBV相关疾病(肝硬化、肝癌)。乙型肝炎病毒导致的严重的肝炎疾病，所以研发有效的抗病毒治疗至关重要。核苷类药物发展迅速，市场上已经出现了新的有效抗病毒药物，拉米夫定(lamivudine)是近年来新合成的二脱氧胞嘧啶核苷类似物，通过抑制逆转录酶的作用从而抑制乙型肝炎病毒的复制。拉米夫定在服用初期表现出良好的抗病毒特性，长期服用会出现耐药性，并且伴有乙型肝炎的复发。拉米夫定耐药性在治疗1、2、3、4年分别为17％，40％，55％和67％。检测耐药变异株产生非常重要，为临床治疗提供指导。实验中设计引物和TaqMan-MGB探针，利用TaqMan-MGB探针技术，建立实时荧光定量PCR检测方法。采用real-time PCR方法检测160例采自长期拉米夫定治疗的慢性乙型病毒性肝炎患者血清标本，对16个标本进行直接测序，并将其部分YMDD变异结果与DNA测序结果进行比较，与DNA测序结果完全一致，符合率为100％。本研究采用。TaqMan-MGB探针技术的实时荧光定量PCR方法检测HBVYMDD基因突变。用于检测HBV YMDD基因突变具有操作简单、精确性高、灵敏度高和特异性好等优点。