香茅草精油微乳体系的构建及其抗氧化和抗肿瘤细胞活性的研究

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香茅草精油是一类挥发性芳香天然植物提取物,具有抑菌驱虫、抗氧化、抗炎症和抗肿瘤等药理活性。但因稳定性差,易挥发,不溶于水等特点,其活性组分在贮藏过程中会受损或遭到破坏,活性功效会降低。因此,本研究分析了香茅草精油的化学成分,通过构建O/W型微乳体系,采用伪三元相图来研究微乳体系各组成成分对微乳体系相行为的影响,选择出较优的构成成分构建香茅草精油微乳体系,从而改善精油自身水溶性和稳定性差等特点,提高香茅草精油的生物利用度,探究O/W型香茅草精油微乳液的抗氧化和抗肿瘤细胞的生物活性。本论文的主要结论如下:(1)采用水蒸气蒸馏法提取香茅草精油,通过GC-MS技术分析:共鉴定出65种挥发性物质,主要是一些醛、醇和烯类物质,分别占总量的36.07%,32.06%和8.82%;含量最高的四种成分分别是D-香茅醛(35.69%),香叶醇(16.56%),香茅醇(12.66%)和D-柠檬烯(3.77%)。(2)优选香茅草精油O/W型微乳液配方,得到最佳配比;选用电导率法和流变法研究微乳构型变化。最后制得以Tween 80与无水乙醇为混合活性剂,两者质量比Km=3:1,再与精油以质量比8:2混合,滴加70%水分含量,得到目的微乳液分散体系。其粒径为16.50 nm左右,多分散系数PDI值为0.47。(3)分别用DPPH自由基清除实验、氧自由基吸收能力测定法(ORAC)和过氧自由基清除能力测定法(PSC)来分析比较香茅草精油和水分含量分别为70%,50%以及15%配方组分的O/W型,B.C型和W/O型香茅草精油微乳液的抗氧化活性。在DPPH实验中,各配方组分微乳液的反应速率都高于香茅草精油,且在反应60 min后,仅O/W型微乳液表现出比精油更好的DPPH自由基清除效果;在DPPH清除能力的测定实验中,香茅草精油的EC50值显著低于70%配方组分的EC50。而在ORAC和PSC方法的水溶性体系中,70%配方组分微乳液的抗氧化活性高于香茅草精油本身(C-EO的ORAC值和PSC值分别为0.35μmol TE/mg和1.53μmol VE/g,70%配方组分微乳液的ORAC值和PSC值分别为1.94μmol TE/mg和32.15μmol VE/g)。在比较不同贮藏时间和贮藏温度的样品的抗氧化活性实验中,三种方法的实验结果均显示在一个月内,微乳液的抗氧化活性无明显降低现象,且相对于低温环境,香茅草精油微乳液更适合放置于室温下保存。(4)研究香茅草精油以及水分含量为70%和50%配方组分的微乳液以人肝癌细胞HepG2和乳腺癌细胞MDA-MB-231为模型的抗肿瘤细胞活性。香茅草精油及其微乳液对两株肿瘤细胞均具有抑制作用,且70%配方组分微乳液的活性最强,50%配方组分次之,香茅草精油活性最弱。不同剂量70%配方组分微乳液作用于肿瘤细胞,其细胞形态会发生不同程度的变化,最终导致细胞畸形或破裂。经过一个月时间的贮藏,室温下保存的微乳液对HepG2细胞的活性无明显变化,而对MDA-MB-231细胞的活性有小幅度降低;且相对于低温条件,室温下贮藏的香茅草精油微乳液具有更好的肿瘤细胞抑制活性。70%配方组分微乳液可以诱导HepG2和MDA-MB-231细胞发生凋亡,并且呈剂量依赖性。
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