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目的:熟悉并掌握人乳头瘤病毒(HPV) E6/E7 mRNA的检测方法—支链DNA技术(bDNA)。评价bDNA对HPV E6/E7 mRNA检测的临床价值。观察并探讨以HPV E6/E7mRNA为基础的bDNA检测技术比以HPV DNA为基础的第二代杂交捕获技术(HC-2)在宫颈疾病预后的价值,在预见宫颈疾病风险上的临床意义。 方法:液基薄层细胞学检测(TCT)340例患者,其中细胞学异常的患者共236人。236例细胞学异常患者中有90例患者的细胞学为意义未明的不典型鳞状细胞(ASCUS)、80例为低度鳞状上皮内病变(LSIL)、56例为高度鳞状上皮内病变(HSIL)、10例为不典型鳞状细胞(不除外高度鳞状上皮内病变)(ASC-H)分别使用支链DNA技术及第二代杂交捕获技术检测TCT标本中HPV E6/E7mRNA及高危HPV DNA的总体分布情况及在不同异常细胞学级别中的分布情况。同时对行TCT检查时有可疑病变的妇女进行阴道镜下宫颈病理学检查。用组织学诊断来评估HPV检测的临床意义,中重度宫颈不典型增生及宫颈癌(CIN2+)作为临床诊断的“金标准”。 结果:随着细胞学异常程度的增加,HPV E6/E7 mRNA对预测CIN2+风险的特异性逐渐升高,HPV DNA对预测CIN2+风险的灵性度逐渐升高。而且不同细胞学异常级别中HPV E6/E7 mRNA的特异性均高于HPV DNA;随着细胞学异常级别的增加,TCT、HPV DNA及HPV E6/E7 mRNA检测指标的阳性诊断率都是逐渐增加的,但是在同组异常细胞学组中的TCT阳性诊断率小于HPV DNA的阳性诊断率、HPV DNA的阳性诊断率小于HPV E6/E7 mRNA的阳性诊断率,而且HPV E6/E7 mRNA及HPV DNA具有一致性(Kω=0.8512,Se(Kω)=0.1081,u=7.87,P<0.05)。TCT联合HPV E6/E7 mRNA的检测比单独TCT的检测对于宫颈癌筛查更有临床价值;HPV E6/E7 mRNA的拷贝量与病理学诊断的严重程度成正相关,随着病理诊断结果的严重性加重,HPV E6/E7 mRNA的拷贝量随之升高。 结论:HPV E6/E7 mRNA作为一种宫颈癌早期筛查指标,具有极高的特异性和阳性预测价值,弥补了传统的HPV DNA检测特异性不高,阳性预测值极低的不足。更为重要的是,HPV E6/E7 mRNA又是一种宫颈上皮细胞癌变进展的预测指标,其高表达预示HPV的癌基因E6、E7处于活动期,且极可能产生E6、E7癌蛋白,并促进宫颈上皮细胞癌变进展,反之将可能延缓癌变,甚至转归正常。