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第一部分人成熟卵泡液中CNP含量与IVF妊娠结局及相关因素分析 目的：明确人成熟卵泡液中CNP含量与临床妊娠结局的关系；探索卵泡液中CNP含量的可能影响因素，如患者试管婴儿类型(如供精试管婴儿、夫精试管婴儿)、授精方式、不孕类型等与卵泡液CNP含量的相关性；并检测人成熟卵泡液中环磷酸鸟苷（cGMP）及CNP含量的相关性。 方法：收集158例于2014.3.1-2015.3.1期间在华中科技大学同济医学院生殖医学中心行常规IVF不孕患者的成熟卵泡液及其临床资料，进行回顾性分析。ELISA检测人成熟卵泡液中CNP浓度并分析其与患者妊娠结局、试管婴儿类型、授精方式等的关系。同时取30例IVF患者的成熟卵泡液同时检测cGMP与CNP浓度并分析其两者的相关性。 结果：按照妊娠结局将患者分为未妊娠组（85例）和临床妊娠组(共73例)，其成熟卵泡液CNP浓度分别为17.41±13.15 ng/L、13.61±5.31 ng/L，差异有统计学意义。临床妊娠组又包括继续妊娠组（60例）、胚胎停育组（5例）及宫外孕组（8例）。其中，继续妊娠组CNP浓度为13.31±5.25 ng/L，明显低于未妊娠组；胚胎停育组及宫外孕组成熟卵泡液CNP浓度（分别为14.33±4.66 ng/L，15.42±6.32 ng/L）与未妊娠组相比无统计学差异；胚胎停育组及宫外孕组成熟卵泡液CNP含量高于继续妊娠组，但差异不明显。按照试管婴儿类型不同分为供精试管婴儿组(28例)和夫精试管婴儿组（130例），供精试管婴儿组卵泡液CNP浓度为10.78±1.68ng/L，明显低于夫精试管婴儿组(16.67±11.19 ng/L)，差异有统计学意义。按照授精方式不同分为IVF组（106例）与ICSI组（52例），结果显示IVF、ICSI成熟卵泡液中CNP浓度分别为14.98±10.52 ng/L、17.25±10.08ng/L，IVF组CNP浓度低于ICSI组，但其差异无统计学差异。最后，成熟卵泡液中CNP浓度与cGMP浓度的相关性分析显示两者呈强烈正相关。 结论：妊娠组成熟卵泡液中CNP含量明显低于未妊娠组卵泡液中CNP含量，提示人卵泡液中CNP浓度与妊娠结局相关；供精试管婴儿组CNP浓度明显低于夫精试管婴儿组，提示两组中IVF患者的卵泡液CNP含量不同，可能与其卵巢功能有关；IVF卵泡液CNP含量低于ICSI组，但无统计学差异；成熟卵泡液中CNP浓度与cGMP浓度呈强烈正相关。 第二部分 CNP及其受体NPR-B在小鼠卵母细胞及胚胎上的表达 目的：明确CNP及其受体NPR-B在小鼠各期卵母细胞及胚胎上的表达情况，探讨其在卵子功能及胚胎早期发育中的作用。 方法：取不同时期的小鼠的卵细胞：GV期（胚泡期）、GVBD期（胚泡破裂期）、MII(成熟卵)、2-cell胚胎、4-cell胚胎、8-cell胚胎、囊胚，应用间接免疫荧光技术标记CNP及其受体NPR-B，在激光共聚焦显微镜下观察其表达情况。 结果：CNP及NPR-B自未成熟卵母细胞到囊胚阶段均有表达。 结论：CNP及NPR-B自未成熟卵母细胞到囊胚阶段均有表达，因此 CNP极有可能在卵子成熟、胚胎早期发育过程中发挥促进作用。 第三部分 CNP对小鼠体外授精及早期胚胎发育的影响 目的：在仅在精子获能、授精及早期胚胎发育不同阶段的作用观察CNP对精卵结合及早期胚胎发育的影响。 方法：实验分为三个部分。第一，仅在在精子获能液中,添加10-6mol/L CNP孵育精子1-1.5h,取获能精子进行体外授精,观察受精率和囊胚形成率；第二，在精卵结合授精阶段添加不同浓度的CNP(0、10-6mol/L、10-7mol/L)，观察比较各组受精率和囊胚形成率，选择CNP对体外授精过程的最佳作用浓度；第三，在体外胚胎培养阶段添加不同浓度CNP(0、10-6mol/L、10-7mol/L)，分析比较不同组间受精率和囊胚形成率，选取提高早期胚胎发育能力的最适浓度。 结果：当精子获能液中含有CNP(10-6mol/L)时，其受精率和囊胚形成率（79.84%vs62.14%）明显高于对照组(67.08%vs50.93%),差异有统计学意义。当体外授精液中添加CNP时，受精率和囊胚形成率明显提高(10-6mol/L：79.24%vs65.71%；10-7mol/L：76.92%vs66.32%）,高于对照组(67.95%vs54.09%)，差异有统计学意义。胚胎培养液中添加CNP时，CNP10-7mol/L与对照组（CNP0mol/L）相比，受精率（79.52%vs68.70%）及囊胚形成率（68.86%vs54.43%）明显提高,差异有统计学意义。 结论： CNP可分别通过提高精子活力、精卵结合能力进而提高体外授精能力，最佳浓度为10-6mol/L。此外CNP对早期胚胎发育起到一定的促进作用，其最佳浓度为10-7mol/L。