肝细胞肝癌患者CD4~+Treg与Th17淋巴细胞构成变化及临床意义

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目的:观察肝细胞肝癌(HCC)患者外周血及肿瘤组织中CD4~+Treg/Th17淋巴细胞构成变化,探讨其临床意义。方法:采用流式细胞术(FACS)检测26例HCC患者外周血、癌组织、癌旁组织中CD4~+Treg细胞及Th17细胞占CD4~+阳性细胞的比例,以及11例肝血管瘤患者的外周血及肝组织中CD4~+Treg细胞及Th17细胞占CD4~+阳性细胞的比例,进一步采用RT-PCR检测HCC患者癌组织、癌旁组织及肝血管瘤患者肝组织中IL-6及IL-17的m RNA的表达变化;统计分析HCC患者临床指标,包括:年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤个数、术前甲胎蛋白(AFP)、是否包膜完整等。探讨各项临床指标与CD4~+Treg细胞和Th17细胞构成变化间的相关性。结果:1.HCC外周血中CD4~+Treg与Th17细胞占CD4~+细胞的比率均显著高于对照组肝血管瘤患者(8.80±1.65%VS 3.60±1.83%,P<0.05;4.07±0.68%VS 1.39±0.41%,P<0.05),差异有统计学意义。CD4~+Treg/Th17比例在HCC中与对照组肝血管瘤(2.17±0.31 VS 2.57±0.53,P<0.05)统计分析,差异无统计学意义。2.CD4~+Treg占CD4~+T细胞的比例与Th17细胞占CD4~+细胞的比率间呈正相关关系(r=0.897,P<0.05)。多元线性逐步回归分析HCC患者CD4~+Treg及Th17细胞变化与相关临床指标关系发现,HCC外周血中CD4~+Treg、Th17淋巴细胞与患者TNM分期密切相关(YTreg=5.897+1.396TNM,YTh17=2.647+0.687TNM);外周血CD4~+Treg细胞及Th17细胞占CD4~+细胞比例在不同TNM分期中不同(I期(8例)<II(8例)<III、IV期(10例);(CD4~+Treg:7.27±0.81%<8.69±0.46%<10.64±1.36%;Th17细胞:3.37±0.12%<4.02±0.24%<4.93±0.33%),差异具有统计学意义;但是其CD4~+Treg/Th17在TNM分期中分别为(I期:2.19±0.21、II期、2.15±0.21、III、IV期:2.16±0.34),差异无统计学意义。3.肝细胞性肝癌患者癌组织CD4~+Treg及Th17细胞占CD4~+细胞比率显著高于癌旁组织与肝血管瘤肝组织(CD4~+Treg:8.93±1.38%VS 4.30±1.28%VS 0.77±0.68%,P<0.05;4.76±0.75%VS 2.30±0.26%VS 0.77±0.31%,P<0.05)),差异具有统计学意义;癌组织及癌旁组织中CD4~+Treg/Th17比值均高于肝血管瘤肝组织(癌组织:1.95±0.54 VS 1.28±0.47,P<0.05;癌旁组织:1.87±0.37 VS 1.28±0.47,P<0.05),差异有统计学意义。4.RT-PCR检测发现肝癌组织IL-6、IL-17m RNA相对表达量显著高于癌旁组织IL-6、IL-17m RNA的相对表达量(IL-6:42.81±0.66 VS 5.78±0.49,P<0.05;IL-17:30.27±0.72 VS 2.71±0.79,P<0.05),显著高于肝血管瘤肝组织IL-6、IL-17m RNA相对表达量(IL-6:42.81±0.66 VS 1.00±0.82,P<0.05;30.27±0.72VS 1.00±0.80,P<0.05),且差异有统计学意义。结论:1.HCC患者外周血中CD4~+Treg及Th17细胞占CD4~+T细胞比率高于对照组肝血管瘤患者,且随着TNM分期的增加而增加;组织中CD4~+Treg细胞及Th17细胞占CD4~+T细胞比率癌组织及癌旁组织均高于肝血管瘤肝组织。2.CD4~+Treg细胞和Th17细胞比率升高及CD4~+Treg/Th17比值的变化与HCC的发生发展密切相关。
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