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背景:窒息性心跳骤停是麻醉过程中严重的意外,心跳停止后脑组织处于严重的缺血缺氧状态,心肺复苏(CPR)成功后大部分患者常伴随严重的神经功能障碍。然而由于缺乏对其机制的全面认识,目前还缺少有效的防治方法。异丙酚是临床上广泛应用的一种静脉麻醉药物,临床试验和动物实验均表明异丙酚预处理对脑缺血性损伤具有显著的保护作用,但其对于复苏后脑损伤的保护作用及机制还不清楚。在中枢神经系统中,小胶质细胞是一类重要的免疫监视细胞。在炎症或损伤时,小胶质细胞会被激活。研究提示,小胶质细胞的活化可能与复苏后的脑损伤有关。同时,离体研究证实,异丙酚对小胶质细胞的活化具有抑制作用。本研究采用大鼠窒息模型,综合利用分子生物学、形态学、免疫组织化学等方法,研究了小胶质细胞活化在心跳骤停后脑损伤发生过程中的作用,同时观察异丙酚预处理对复苏后脑损伤的作用以及对小胶质细胞活化的影响,从而在进一步阐明异丙酚的脑保护机制的同时,为围手术期心肺复苏后的脑保护开辟新的途径。目的:探讨异丙酚预处理在心肺复苏后脑损伤中的作用和机制。方法:(1)建立大鼠窒息性心跳骤停模型;(2)运用免疫组织化学的方式检测复苏后小胶质细胞标记物OX-42的表达变化;(3)进一步用Western blot观察复苏后小胶质细胞活化标记物Iba1的表达水平;(4)运用免疫荧光双重标记方法观察P2X7R、p-p38分别和OX-42的双重标记情况;(5)Western blot检测复苏后P2X7R、p-p38的表达变化;(6)Morris水迷宫检测小胶质细胞抑制剂米诺环素对复苏后学习记忆功能的影响;(7)Western blot进一步研究米诺环素对小胶质细胞活性的影响;(8)Western blot检测米诺环素对复苏后caspase-3表达的影响;(9)水迷宫检测异丙酚预处理对复苏后学习记忆能力的影响;(10)免疫组织化学检测异丙酚预处理后小胶质细胞活化标记物OX42的表达变化;(11)Western blot检测异丙酚预处理后P2X7R、p-p38的表达变化;(12)Western blot检测异丙酚对复苏后caspase-3的表达的改变;(13)组织学检测异丙酚对复苏后海马神经元损伤的影响。结果:(1)窒息性心跳骤停可引起海马CA1区小胶质细胞OX42表达的明显升高;(2)复苏组海马中小胶质细胞的蛋白水平标记物Iba1显著上调;(3)P2X7R仅表达于活化的小胶质细胞;(4)磷酸化p38高表达于活化的小胶质细胞;(5)米诺环素可抑制小胶质细胞活化,减轻复苏后的学习和记忆功能降低;(6)米诺环素可抑制复苏后大鼠海马Iba-1的高表达;(7)米诺环素可降低复苏后海马caspase-3的高表达;(8)异丙酚预处理可有效减轻复苏后的学习和记忆功能损伤;(9)异丙酚预处理可显著降低复苏后P2X7R的表达上调;(10)异丙酚预处理可抑制复苏后p-p38的表达;(11)异丙酚可抑制复苏后caspase-3的高表达;(12)异丙酚可明显缓解复苏后海马CA1区的神经元数量减少。结论:(1)窒息性心跳骤停大鼠复苏成功后,海马小胶质细胞OX42活跃表达,提示小胶质细胞活化与复苏后脑损伤的发生有密切联系。(2)小胶质细胞的活化与P2X7R和p-p38的高表达有关,提示P2X7R和p-p38对小胶质细胞的活化发挥着重要作用。(3)海马小胶质细胞的活化对复苏后的学习和记忆损伤有着重要影响,抑制小胶质细胞活化可减缓复苏后引起的学习和记忆功能障碍。(4)异丙酚预处理可抑制复苏引起的小胶质细胞活化和减轻海马神经元损伤,其机制可能是与异丙酚调控P2X7R和p-p38有关。