调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）在免疫应答的负调节及自身免疫耐受中发挥着非常重要的作用,其与机体的免疫系统的自稳状态、自身免疫性疾病、移植物免疫排斥反应及肿瘤的发生有极其密切的联系。正常情况下.免疫系统在对病原体产生保护性免疫应答的同时,亦能避免产生针对自身抗原的病理性反应,这一现象的机制受到学者的广泛关注。中枢耐受机制不足以完全清除自身反应性T细胞。外周耐受机制,包括T细胞凋亡、免疫无能、效应T细胞分化和调节性T细胞（regulatory T cell,Tr）,在预防免疫病理反应中发挥着重要作用。其中,调节性T细胞的作用尤为重要。调节性T细胞主要功能是抑制其他T细胞的活化,能够阻止针对自身抗原的炎症反应。并能够限制自身免疫病的发展。目前发现转录因子FOXP3对调节性T细胞的分化起到重要的作用,近年的研究显示,forkhead家族转录因子FOXP3（forkhead/winged2helixtranscrip tion factor）,特异表达于该细胞,可作为Treg的特异分子标记物,对该细胞的发育和功能起着重要调控作用。FOXP3（the forkheador winged helix transcription）是叉头样转录因子家族的成员。2001年,Bnmkow等对Scurfy小鼠（小鼠FOXP3基因编码的蛋白质也称为Scurfy）研究时首次报道FOXP3。同年,Wildin和Bennett提出人类FOXP3基因与Scurfy小鼠FOXP3基因具有同源性。FOXP3的缺乏将导致致命的自身免疫性淋巴细胞增生性疾病的发生,且异位FOXP3的表达能使效应T细胞发生表型转化,变为Treg细胞。因此,Foxp3在免疫系统的负调节中发挥非常重要的作用。Foxp3的两个亚型（Foxp3FL和Foxp3△2）在人CD4+CD25+Treg中均表达,并且它们都具有赋予CD4+CD25-T细胞转化为CD4+CD25+Treg的活性,但是目前关于Foxp3的作用机制尚未阐明。鉴于绝大多数分子在细胞内执行功能都是通过蛋白与蛋白之间的相互作用来实现,因此相互作用分子的研究为其机制的阐明提供了线索。目前已知的Foxp3相互作用分子有NFAT、NF-κB、AML1/Runx1、AP-1、RORγt和TIP60,对这些分子的研究已经引起了广泛的关注,但是仅仅围绕对这些分子的研究并不能充分阐明Foxp3的转录调控机制,所以对未知的Foxp3相互作用分子的进一步探讨是Foxp3转录调控研究的热点。我们前期通过酵母双杂交技术以FOXP3为诱饵,筛选了人外周血白细胞cDNA文库中与之相互作用的分子,其中C22orf37是我们获得的能与其发生物理相互作用的分子之一,经Genbank检索及生物信息学软件分析,该基因为功能未知的新基因。对于新基因功能研究而言,抗体的制备是其功能研究的首要必备因素。因此本课题首先应用PCR方法从人外周血白细胞cDNA文库中获得人C22orf37基因,构建人C22orf37融合表达载体,随后诱导表达His-C22orf37融合表达蛋白并对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析和WesternBlot鉴定,结果显示,此分子在原核载体中有表达,然后应用镍螯合层析法纯化重组融合蛋白,并对纯化产物进行纯度分析,纯度达80%,最后用纯化蛋白免疫BALB/c小鼠。通过ELISA检测了血清中抗C22orf37抗体的效价。获得了抗体效假高达1∶10000。综上所述,本实验成功构建了人C22orf37的融合蛋白原核表达载体并完成了人C22orf37融合蛋白的表达与纯化;制备了该蛋白的多克隆抗体;检测了C22orf37蛋白在不同来源的细胞株中的表达情况。为下一步系统研究该蛋白的生物学功能奠定了基础。