三七三萜皂甙合成途径鲨烯环氧酶基因的克隆及初步表达

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目的:为了进一步从分子水平上探讨三萜皂甙生物合成机理及其在药用植物中的应用,对广西中药三七主要有效成分三萜皂甙合成关键酶——鲨烯环氧酶(squalene epoxidase,SE)的基因首次进行了克隆和原核表达。方法:①采用改进的异硫氰酸胍一步法提取三七根总RNA,通过RT-PCR法从三七根组织总RNA中扩增出SE基因的cDNA序列。将该cDNA插入克隆质粒pMD18-T,得到重组克隆质粒pMD18-T-se。通过酶切和测序鉴定,并将SE cDNA序列在GeneBank进行序列比对。②重新设计引物,
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