不同剂量小檗碱对酒精性心肌损伤大鼠的保护作用研究

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目的:本实验通过研究小檗碱对长期大量酒精所致大鼠心肌细胞损伤的保护作用及其最佳保护剂量,探讨可能的保护机理,为小檗碱防治酒精性心肌损伤提供实验依据。方法:选择成年无特定病原体(specific pathogen free, SPF) Sprague-Dawley (SD)雄性大鼠60只,按完全随机设计方法抽取10只作为正常对照组(以下简称对照组),另外50只为实验组,其中10只为曲美他嗪组(以下简称曲美组),予以盐酸曲美他嗪20mg灌胃,10只为低剂量小檗碱保护组(以下简称低BBR组),予以盐酸小檗碱100mg灌胃,10只为中剂量小檗碱保护组(以下简称中剂量BBR组),予以盐酸小檗碱200mg灌胃,10只为高剂量小檗碱保护组(以下简称高剂量BBR组),予以小檗碱400mg灌胃,10只为空白对照组(以下简称空白组)。实验组大鼠每日白酒灌胃,各保护组予以不同剂量小檗碱及曲美他嗪进行干预,对照组与空白组均给予相同量蒸馏水灌胃。12周后测大鼠体重(BW)和全心质量(HW),行心脏超声,心脏采血分离血清,使用免疫比浊法检测C反应蛋白(CRP)的含量,酶联免疫法测定肌酸激酶(CK)及肌钙蛋白T(CTnT)的水平;生化仪测定血清甘油三酯(TG)、血清胆固醇(TC)、血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的水平;用RT-PCR法检测心肌组织中细胞凋亡及凋亡相关基因-细胞淋巴瘤/白血病-2基因(B-Cell lymphoma/leukmia-2, Bcl-2)和Bcl相关蛋白(Bcl-associated x protein, Bax)的表达,常规做心脏HE染色病理切片,观察心肌组织的病理变化。收集并整理数据,两组间采用t检验,均数之间两两比较采用q检验进行统计分析,P<0.05认为有统计学意义。结果:(1)大鼠体重低BBR组、中BBR组、高BBR组、曲美组及空白组均比对照组小(P<0.05),而中、高BBR组明显低于曲美组和低BBR组(P<0.05),余各组间无明显差异(P>0.05);(2)心脏相对质量比较,空白组及低BBR组HW/BW较其余各组均有明显升高(P<0.05);(3)空白组大鼠LVEDD、LVESD、LA较对照组大,Em/Am较对照组低(P<0.05),各试验组中,中BBR组、高BBR组、曲美组LVEDD、LVESD、LA较低BBR组大,而Em/Am较低BBR组低(P<0.05),其余组无明显差异(P>0.05);(4)与对照组相比,实验组CTnT、CK、CRP均升高,空白组和低BBR组血清CTnT、 CK、CRP升高幅度较中BBR组、高BBR组、曲美组明显(P<0.05);(5)与对照组相比,空白组甘油三酯(TG)明显升高,高密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)降低(P<0.05),中、高BBR组甘油三酯(TG)变化不大(P>0.05),胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)降低(P<0.05);(6)空白组和低BBR组HE染色镜下可见多出面积不等的炎细胞浸润,可见心肌细胞肿胀,心肌纤维排列紊乱,而中BBR组、高BBR组和曲美组仅见少量炎性细胞浸润,仅部分心肌纤维排列紊乱;(7)与对照组相比,空白组和低BBR组中心肌Bax表达明显升高(P<0.05), Bcl-2/Bax减小,中BBR组、高BBR组和曲美组心肌中Bax表达轻度升高(P>0.05), Bcl-2表达明显升高(P<0.05), Bcl-2/Bax增大。结论:长期过量饮酒可致大鼠心肌细胞损伤,一定剂量的小檗碱可保护或减轻因长期过量饮酒所引起的心肌细胞损伤。
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