GDH和AMPD基因在鳜和草鱼氨排泄差异中的调控作用研究

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谷氨酸脱氢酶(Glutamate dehydrogenase,GDH)基因和腺苷酸脱氨酶(Adenosine monophosphate deaminase,AMPD)基因是鱼体内的关键脱氨基因。本研究以鳜和草鱼为研究对象,在循环系统式圆柱状实验缸(养殖水体体积:0.3 m~3)中进行养殖实验,研究了六种不同摄食模式和摄食发酵豆粕替代鱼粉饲料的鳜和草鱼的氨排泄差异情况,并探究了直接或间接造成这种差异的体内代谢对氨排泄的影响,阐述了GDH基因和AMPD基因在鳜和草鱼氨排泄差异中的调控作用。主要研究结果如下:1.GDH基因和AMPD基因对六种摄食模式下鳜和草鱼氨排泄差异的调控作用比较选用体质健康的鳜(80±5 g)45尾和草鱼(15±3 g)201尾进行实验,设计6个实验分组(对照Control,C;饱食摄食天然饵料Full feeding with natural bait,FNB;等蛋白质摄食天然饵料Iso-protein feeding with natural bait,INB;饥饿Starvation,S;饱食摄食饲料Full feeding with feed,FF;等蛋白质摄食饲料Iso-protein feeding with feed,IF),每种鱼每组设置3个重复,每个重复保证养殖密度一致。实验组每天定时定点投喂天然饵料(FNB、INB)、饲料(FF、IF)或不投喂(S)。实验结果显示,各摄食模式鳜缸水体氨氮浓度低于草鱼。对于鳜,氨基酸代谢相关指标的检测结果表明肝脏GDH、GS、AS酶活性和肝脏gdh基因表达量均低于草鱼,IF组鳜肌肉AMPD酶活性和ampd基因表达量均高于草鱼。同样,鳜肝脏中的Gln含量也低于草鱼。对于糖酵解,鳜肝脏gck基因表达量高于草鱼且高数十倍;各摄食模式(IF组除外)下鳜肝脏pk基因表达量低于草鱼但不到1倍。关于脂肪分解代谢,鳜肝脏hsl、cpt1基因表达量低于草鱼。综上所述,六种摄食模式下单位体重鳜的氨排泄量均低于草鱼,鳜脱氨代谢相关基因表达量和酶活性低于草鱼,且鳜转氨作用相关的酶活性低于草鱼。同时,糖酵解相对于脂肪分解可能为鳜提供了更多的能量。等蛋白质摄食模式下,草鱼肝脏GDH基因相对于鳜更活跃,鳜肌肉AMPD基因相对于草鱼更活跃。比较增重率和蛋白质保留率得出,鳜比草鱼可能利用更多的蛋白质用于生长。2.摄食发酵豆粕替代鱼粉饲料对鳜和草鱼GDH和AMPD脱氨调控的影响选用体质健康的鳜(54±8 g)120尾和草鱼(54±8 g)120尾进行实验,设计2个实验分组(摄食鱼粉饲料Fish meal,FM;摄食发酵豆粕替代鱼粉饲料Fermented soybean meal,FSM),每种鱼每组设置3个重复。本研究表明,FSM组的鳜和草鱼缸水体氨氮浓度高于FM组。FSM组的鳜和草鱼的大多数生长性能指标低于FM组。氨基酸代谢方面,FSM组鳜和草鱼脱氨代谢、转氨作用酶活性,肝脏gdh基因表达量,肌肉ampd基因表达量高于FM组,肝脏和血浆Gln含量低于FM组。对于糖代谢,FSM组鳜和草鱼肝脏pck、g6pase基因表达量高于FM组,FSM组鳜肝脏gck、pk基因表达量低于FM组,FSM组草鱼肝脏gck基因表达量低于FM组的50%,pk基因表达量高于FM组但不到FM组的200%。脂肪分解代谢方面,FSM组鳜和草鱼肝脏hsl、cpt1基因表达量低于FM组。综合对比鳜和草鱼的所有实验指标,FSM组和FM组鳜多数生长性能指标高于草鱼,鳜缸水体氨氮浓度低于草鱼;鳜氨基酸代谢方面与肝脏、血浆有关的指标均低于草鱼,肌肉AMPD酶活性与ampd基因表达量高于草鱼;鳜肝脏pk基因表达量低于草鱼,gck基因表达量远高于草鱼;鳜肝脏糖异生和脂肪分解代谢基因表达水平低于草鱼。综上,发酵豆粕替代30%鱼粉的饲料对鳜和草鱼体内代谢的影响趋势一致,摄食发酵豆粕替代30%鱼粉的饲料会降低鳜和草鱼的糖酵解基因表达和脂肪分解代谢基因表达水平,导致其供能水平可能降低,从而可能提升鳜和草鱼的GDH基因和AMPD基因表达水平和酶活性以提升脱氨代谢供能水平,最终导致鳜和草鱼的氨排泄量增大。将两个实验结合起来看,等蛋白质摄食模式下,草鱼肝脏GDH基因相对于鳜更活跃,鳜肌肉AMPD基因相对于草鱼更活跃。与草鱼相比,鳜利用蛋白质的效率更高,并且用于生长的能量更高,而氨排泄量更低。摄食发酵豆粕替代30%鱼粉的饲料会降低鳜和草鱼的生长性能,且该替代对鳜和草鱼体内的供能代谢和氨排泄的影响趋势一致:可能降低鳜和草鱼的糖酵解和脂肪分解供能水平,进而提升鳜和草鱼的GDH基因和AMPD基因脱氨代谢供能水平,最终提升鳜和草鱼的氨排泄量。
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