第一部分载黑色素脂质纳泡造影剂的制备及其特性研究目的制备一种载生物内源性光吸收子—黑色素的脂质纳泡造影剂,检测其基本特性并考察体外超声/光声显像效果。方法采用乙醚滴定法制备包裹黑色素的脂质纳米微球,再通过真空冷冻干燥法充入全氟丙烷(C3F8)气体,制备载黑色素的脂质纳泡造影剂。检测其基本形态、结构,粒径、表面电位,黑色素含量以及紫外可见光波长范围内的吸收光谱。在体外琼脂糖凝胶模型中考察其不同浓度的超声和光声显像效果。与MDA-MB-231细胞孵育,检测不同时间内(6h,12h,24h)细胞的活性情况及细胞对造影剂的吞噬情况。结果通过乙醚滴定法成功制备出包裹黑色素的脂质纳米微球,光镜下观察微球形态规则,大小分布均匀,平均粒径为(284.20±85.54)nm,表面电位为(-51.30±5.98)m V。透射电镜下可见黑色素颗粒较均匀地分布于脂质微球内。紫外可见分光光度计测得黑色素的含量为95.10μg/mg。在300 nm~800 nm波长范围内,均有较强的光吸收能力,随着波长的增加光吸收值逐渐降低。经真空冷冻干燥充入C3F8气体溶于双蒸水后,呈棕黑色混悬液,分散性较好。体外超声显像,能够明显地增强基波及谐波显影效果,回声强度随浓度的增加而增强;在光声显像中,具有较强的光声成像能力,光声信号随浓度增加而增强。台盼蓝拒染法测得造影剂对细胞活性无明显影响。激光共聚焦显微镜观察,细胞质内见大量经Di I标记的红色荧光造影剂聚集。细胞吞噬造影剂后,进行光声显像,随孵育时间增加,光声信号强度呈增强趋势。结论成功制备出性能稳定,粒径较小,大小均匀,分散性较好,生物安全性高的载黑色素的新型脂质纳泡造影剂,能够同时用于超声、光声双模态显像,有望成为一种新型的基于超声显像的多模态分子探针。第二部分载黑色素脂质纳泡造影剂增强肿瘤超声、光声成像实验研究目的建立裸鼠乳腺癌移植瘤模型,考察并评价载黑色素脂质纳泡造影剂体内肿瘤超声、光声显像效果。方法采用乙醚滴定法和真空冷冻干燥法制备载黑色素脂质纳泡造影剂。建立裸鼠乳腺癌皮下移植瘤模型,经尾静脉注入造影剂后,动态观察肿瘤模型实质内超声及光声显像强化情况,应用DFY型超声图像定量分析诊断仪和Vevo LAZR软件对肿瘤兴趣区超声及光声信号进行定量分析,评价其显像效果。注射造影剂(经Di I标记)2 h后,采集标本,行快速冰冻切片,激光共聚焦显微镜观察造影剂在肿瘤组织中聚集效果。结果成功制备了载黑色素脂质纳泡造影剂,在裸鼠移植瘤模型中,经尾静脉注射造影剂后,超声谐波信号及光声信号得到较明显地增强;在超声造影实验中,注射造影剂15 s后回声信号达到峰值,然后逐渐降低,大约12 min后回声信号基本消失;在光声显像实验中,注射造影剂后30 min内光声信号强化较弱,而后明显增强,大约3 h后光声信号达到峰值。激光共聚焦显微镜显示,肿瘤组织间隙内见大量的Di I标记的红色荧光造影剂聚集。结论载黑色素脂质纳泡造影剂具有增强体内超声及光声显像能力,能够透过肿瘤新生毛细血管内皮间隙,具有实现肿瘤血管外显像及治疗的潜能。