背景:前列腺癌是泌尿男性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一,在我国前列腺癌的发病率也在逐年上升。和大多数肿瘤一样,前列腺癌的发生是一个多染色体异常,多基因改变,多步骤发展的复杂过程。细胞信号转导是当今生物医学研究领域最前沿,最活跃的主题之一。细胞活性受外部信号控制,外部信号传人细胞内部后引起细胞内的一系列反应,这一过程称为信号转导。细胞信号转导异常,会导致细胞快速增殖、无限生长,此即恶性肿瘤。近年来随着分子肿瘤学、分子药理学的发展,信号转导在肿瘤形成过程中的作用机制正在逐步被阐明,信号转导通路已成为抗肿瘤药物的新靶点。所以对于肿瘤信号转导途径中的调节功能及机理的研究具有重要临床意义,特定分子研究可为了解特定肿瘤的分子生物学特性以及制定肿瘤的个体化诊疗方案提供理论基础,也可进一步为临床上肿瘤基因研究与治疗提供依据。而Wnt信号转导途径是目前已知的胚胎发育所必须的信号转导途径,同时在肿瘤的发生、发展中该信号转导途径也占据着重要的地位;该通路的过度激活在前列腺癌的发生、进展中扮演重要角色。Wnt信号转导途径由Wnt蛋白、卷曲蛋白(FZ)、散乱蛋白(Dv1)、APC复合物[由糖原合成激酶.3(GSK一3β)、Axin蛋白、APC蛋白组成]、β-连环蛋白(β-catenin)、转录因子Tcf/Lef等构成。当Wnt信号中Axin发生突变时,APC复合物解体,GSK-3β失去降解β-catenin的活性,引起β-catenin在细胞内的聚积,当蓄积在细胞质内β-catenin达到一定水平后便移向细胞核内,与转录因子Tcf/lef家族成员形成复合体,通过上调c-myc,cyclin D1等靶基因的表达而使细胞癌变。Wnt信号中的Axin正常表达,复合物使β-catenin发生磷酸化,然后磷酸化的β-catenin进一步被泛素化,最后被蛋白酶体分解,使细胞质内β-catenin的量保持在较低水平。因此Axin是Wnt/β-catenin信号转导途径中重要的负性调节分子、其低水平表达可导致胞质中游离β-catenin积聚。研究前列腺癌组织中Axin和β-catenin的表达情况及相互关系具有重要意义,目前临床上关于Axin和β-catenin在食管癌,肝癌,肠道肿瘤等方面的研究报道较多,而关于其在前列腺癌方面的研究国内外报道不多。本研究以前列腺癌和前列腺增生组织标本为研究对象,运用荧光定量PCR和免疫组化方法检测其中Axin,β-catenin的表达情况,了解他们在前列腺增生及前列腺癌中的表达规律以及与癌肿病理分级关系。为深入研究前列腺癌的生物学特性提供一定的实验依据。目的:探讨Axin、β-catenin在前列腺增生和前列腺癌组织中的表达情况及其差异,以及与癌肿病理分级的关系。为今后Axin引入前列腺癌分子靶向治疗,探索Axin在前列腺癌尤其是激素非依赖前列腺癌治疗中的应用奠定一定的实验基础。方法:收集我院泌尿外科收治的符合实验条件前列腺增生及前列腺癌患者病理标本共90例(前列腺增生患者45例,前列腺癌患者45例)以及临床相关资料,所有标本编号,按照行PCR和免疫组化检测要求分别收集存放。采用荧光定量PCR方法检测Axin,β-catenin在肿瘤和增生组织中mRNA表达情况。同时采用免疫组织化学方法检测Axin蛋白,β-catenin蛋白在肿瘤和增生组织中的表达情况。收集实验数据后,采用统计学方法分析两种基因和蛋白在癌肿组织及增生组织表达的差异以及与肿瘤病理分级的联系。结果:荧光定量PCR结果显示:所有90例标本(前列腺增生45例,对照前列腺癌45例),Axin基因mRNA在前列腺增生组织中基因表达的拷贝数明显高于在前列腺癌组织,P<0.05。而β-catenin基因mRNA在前列腺癌组织中表达的拷贝数明显高于前列腺增生组织,P<0.05。所有45例前列腺癌患者,Axin mRNA拷贝数与病理分级的Gleason评分之间无明显的相关性,但是β-catenin mRNA拷贝数与对应标本病理分级的Gleason评分之间有明显的正相关性(r=0.91)。免疫组化结果显示:所有45例前列腺癌标本中β-catenin蛋白阳性染色占83.3%(35/45),而45例前列腺增生组织β-catenin蛋白阳性染色为40%(18/45),采用卡方检验,组间差异有统计学意义(P<0.01)。前列腺癌组织中Axin蛋白阳性染色占28.9%(13/45),前列腺增生组织中为80.0%(36/45),卡方检验组间差异明显(P<0.01)。对所有前列腺癌患者按照年龄及术后病理分级分组后与再分析其与β-catenin,Axin的表达关系发现:45例患者年龄大于70岁的有22例,β-catenin蛋白阳性表达17例,达到77.2%,年龄小于70岁的有23例,β-catenin蛋白阳性亦有18例,达到78.2%,采用四格表卡方检验后得出P>0.05,差异无统计学意义。同理分析Axin蛋白,发现Axin蛋白的表达与患者年龄之间差异无明显统计学意义(p>0.05)。癌肿按照病理分级分为高分化组及低中分化组(Gleason2-4分为高分化,5-10分为中低分化)分析病理分级与β-catenin蛋白表达关系发现:高分化组13人,其中7人β-catenin蛋白阳(53.4%),中低分化组32人,其中β-catenin蛋白阳性28人,占87.5%。统计分析显示β-catenin蛋白阳性表达与病理分级差异明显(P<0.05)。同理分析Axin蛋白,其在癌肿组织中的表达与病理分级也密切相关(P<0.01)我们的分析得出:β-catenin和Axin蛋白在前列腺癌组织中的表达与患者年龄无明显相关性,但是和病理分级之间有统计学意义,高分化组患者β-catenin蛋白阳性表达明显高于中低分化组。Axin蛋白却相反,中低分化组患者Axin蛋白阳性表达明显低于高分化组。结论:前列腺癌组织中Axin基因mRNA呈现低表达,β-catenin呈现高表达。β-catenin mRNA拷贝数和癌肿病理分级呈现正相关,并且癌肿组织β-catenin蛋白的阳性表达明显高于增生组织,而Axin蛋白的阳性表达明显低于增生组织。进一步论证了Wnt信号转导途径中二者可能的相关关系。为Axin引入前列腺癌分子靶向研究提供了实验依据。同时我们发现β-catenin,Axin蛋白在癌肿组织中的表达情况与肿瘤病理分级之间有明显相关性。