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亨廷顿舞蹈症是一种常染色体显性遗传的神经退行性疾病,其致病机理在于位于4号染色体的Huntingtin基因1号外显子发生突变,导致其翻译出的HTT蛋白携带有过长的谷氨酰胺片段,从而引发一系列机体病变,其中最主要受损部位位于大脑纹状体。考虑到缺失HTT的小鼠胚胎不能存活,现有的针对亨廷顿疾病的治疗策略往往只能从mRNA或蛋白质水平抑制突变HTT蛋白的表达或功能,但并不能够做到从基因水平阻断突变Huntingtin的表达。本研究利用新一代基因编辑技术CRISPR/Cas9针对Huntingtin基因进行特异性打靶,从基因组水平上阻断HTT蛋白的表达。首先利用HEK293细胞对CRISPR/Cas9对野生型及突变型HTT打靶效率进行验证,并进一步用在体实验证明,以腺相关病毒AAV为载体通过立体定位注射方法可以在成年的亨廷顿疾病knock-in小鼠模型脑部纹状体中表达gRNA/Cas9,从而对HTT蛋白表达进行敲低。我们的实验结果显示,在9个月的亨廷顿疾病小鼠模型中特异性敲低纹状体神经元中的突变HTT蛋白的表达足以有效缓解亨廷顿疾病小鼠模型的病理变化,减少突变型HTT蛋白聚集小体的形成,降低胶质细胞的激活水平,提高小鼠的运动能力,由此推测在成年HD病人中,可以通过减少突变型HTT的表达减轻HD病征。以上实验结果可以为对Huntingtin功能的研究提供了新的思路,并提示了一种新的针对亨廷顿疾病的治疗策略。