【摘 要】
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上皮间质转化(EMT)是上皮细胞通过特定程序转化为间质表型细胞的生物学过程,EMT与肿瘤的侵袭与转移过程密切相关,是导致肿瘤转移发生的关键因素之一。E-cadherin表达下调是EM
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上皮间质转化(EMT)是上皮细胞通过特定程序转化为间质表型细胞的生物学过程,EMT与肿瘤的侵袭与转移过程密切相关,是导致肿瘤转移发生的关键因素之一。E-cadherin表达下调是EMT发生的标志,也是EMT发生的主要诱因。Snail和ZEB家族蛋白是EMT过程中抑制E-cadherin的表达,同时促进间充质细胞相关基因表达的关键转录因子,它们不仅能诱导EMT发生,也与肿瘤的侵袭与转移过程密切相关。我们在前期已经报道miR-30b能靶向Snaill的3’UTR下调其表达,并在体外实验中抑制TGFβ诱导的小鼠肝细胞EMT过程。虽然临床肝癌组织样本的基因芯片分析已经发现miR-30a、-30c、-30d和-30e与肝癌转移过程密切相关,但miR-30b在肝癌细胞转移中的作用至今未有报道。在本论文中我们检测不同转移能力的人肝癌细胞系中miR-30和miR-101表达水平,发现miR-30b和miR-101的表达与肝癌细胞的转移能力呈负相关,而且高转移能力的肝癌细胞中Snaill和ZEB1的表达明显升高。随后我们构建了表达miR-30b的慢病毒并筛选出高表达miR-30b的稳转肝癌细胞系,原位植瘤的实验结果表明,miR-30b能显著抑制肝癌细胞的肺转移。体外实验则证实,miR-30b能显著抑制肝癌细胞Snaill的表达,改变肿瘤细胞形态,并降低肿瘤细胞的迁移和增殖能力。另外我们也发现miR-101能靶向ZEB1的3’UTR抑制ZEB1的表达,进一步的细胞实验证实miR-101能通过下调ZEB1的表达改变肝癌细胞形态,并抑制肝癌细胞的迁移和增殖。综上所述,我们发现了 miR-30b及miR-101通过抑制肝癌细胞EMT的发生,阻止肝癌的侵袭与转移的实验证据,为深入研究miR-30b和miR-101在肿瘤转移中的作用奠定了基础。
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