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目的:通过将搭载TLR4抑制剂的壳聚糖纳米微球包被于3D打印的种植体上并植入比格犬体内,探讨TLR4抑制剂在体内抑制炎症反应、促进种植体骨结合的作用。方法:1.将TLR4抑制剂（TAK242）配制成不同终浓度的药液,滴加到接种MC3T3-E1细胞的96孔板中,用CCK-8法筛选适宜的药物浓度。采用离子交联法制备壳聚糖纳米微球（CSn）及搭载TLR4抑制剂的纳米微球（CSn-anti-TLR4）,透射电镜（Transimission Electronic Microscopy,TEM）观察两种微球形态,激光粒度仪,红外光谱仪检测两种微球的性质。用Geomagic studio2012及Rhino6.0建模软件设计钛片（Tis）,3D打印直径为3cm,孔径为300μm,孔隙率为60%的Tis,用浓盐酸、浓硫酸、去离子水（2:1:1）配置的混酸酸蚀Tis。将两种纳米微球以浸提法包被于酸蚀后的Tis表面,分组:实验组（Tis-CSn-anti-TLR4）,壳聚糖组（Tis-CSn）、空白组（Tis）,扫描电镜（Scanning Electron Microscope,SEM）观察3组Tis表面;将MC3T3-E1细胞接种到3组Tis上,CCK-8检测细胞增殖情况,荧光染色观察细胞粘附情况。2.挑选8只1.5岁、健康、雄性比格犬,随机标记为B1-B8,选取右侧下颌第三、第四前磨牙作为目标牙,共16颗牙（32个牙根）,拍锥形束CT（CBCT）为原始图像,将CBCT图像导入建模软件,用相同方法根据CBCT设计种植体（Ti）,3D打印的种植体与Tis的规格相同。将Ti清洗、消毒、灭菌后包被两种纳米微球,分成3组:TLR4抑制剂组（Ti-CSn-anti-TLR4）;壳聚糖组（Ti-CSn）;对照组（Ti）。常规消毒、全麻下将3组种植体即刻植入比格犬右侧下颌相应前磨牙处,严密缝合。1个月后用Hounsfield Unit（HU）评价种植体骨结合情况,取种植体周围骨组织提RNA,做RT-PCR分析骨组织中相关细胞因子的表达情况。结果:1.CCK-8结果显示:当TAK242药物终浓度为2μM时最有利于细胞增殖。TEM和激光粒度仪结果均显示包载药物后CSn-anti-TLR4的平均粒径（25-155nm,335.6nm）均较CSn（25-29nm,237.4 nm）增大。CSn的zeta电势平均值为+18.8 mv,CSn-anti-TLR4的zeta电势平均值为+12.4mv。与CSn相比CSn-anti-TLR4在1000cm-1处有个明显的波峰。证明TAK242被壳聚糖包饶。SEM观察3组钛片,未酸蚀的Tis表面有尖锐的突刺;酸蚀后的Tis表面圆钝:Tis-CSn表面包被许多CSn微球,Tis-CSn-anti-TLR4表面有CSn-anti-TLR4微球及TAK242的晶体。荧光显微镜下可见细胞在三组Tis上粘附生长良好,CSn-anti-TLR4细胞增殖最多。2.手术后1个月拍CBCT观察骨结合情况。Ti,Ti-CSn,Ti-CSn-anti-TLR4的HU值依次增大;全麻下取骨组织提取RNA检测骨组织中相关炎症因子及TLRs信号通路分子的表达量。Ti,Ti-CSn,Ti-CSn-anti-TLR4中的MyD88 mRNA、TRIF mRNA、IL-10 mRNA、TNF-αmRNA表达依次降低,抗炎症因子TGF-βmRNA表达依次升高,然而TLR4 mRNA、TLR2 mRNA仅在Ti-CSn-anti-TLR4组中表达升高,差异具统计学意义。结论:1.TLR4抑制剂通过抑制炎症反应促进种植体骨结合。2.CSn可能通过抑制TLRs下游通路抑制炎症反应,但不经过TLR2和TLR4通路。3.TLR4抑制剂可能是一种促进种植体骨结合新的治疗策略。