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本试验为探讨有关杂环类杀虫剂的免疫化学特性，选择杂环类农药中比较有代表性两种：吡虫啉、氟虫腈为研究对象，分别建立了吡虫啉间接竞争ELISA法和氟虫腈的直接竞争ELISA法。以杀虫剂吡虫啉原药为起始原料在碱性条件下与β-巯基丙酸反应合成了半抗原IM，采用活性酯法使其与蛋白质偶联制备了免疫原IM-BSA。氟虫腈在碱性或酸性条件下分子中的氰基水解为羧基，然后活化偶联到载体蛋白游离氨基上制备了一种免疫原FH1-BSA；直接利用吡啶环上的氨基采用戊二醛法偶联到载体蛋白游离羧基上制备另外一种免疫原FH-GD-BSA。采用混合酸酐法制备了两种包被原IM-OVA和FH1-OVA。对各偶联物进行紫外光谱扫描，并计算出半抗原与载体蛋白的结合比均在8～35：1之间，符合小分子免疫学的要求。 将免疫原与适当的佐剂进行乳化后，免疫新西兰兔制备了多克隆抗体。用间接ELISA测定了各自的效价，其中免疫原IM-BSA免疫兔子获得了高效价抗吡虫啉抗体，抗血清效价在1：2.56×104～1：5.12×104之间；同时免疫原FH1-BSA免疫兔子也获得了高效价抗体，抗血清效价在1：2.56×104～1：6.4×104之间，而由FH-GD-BSA得到的抗血清效价较低，最高的仅为400。用辛酸-硫酸铵盐析法分别对三种抗血清进行纯化并制成冻干粉保存于-20℃。采用改良过碘酸钠法制备了酶标抗体，其中抗FH1-BSA的酶标抗体效价较高为1：5000。 利用制备的抗体与酶标抗体，在优化条件下分别建立吡虫啉间接ELISA法和氟虫腈直接ELISA法。吡虫啉间接ELISA法抑制反应曲线在1～103μg／ml吡虫啉标样浓度与抑制率有较好线性关系，标准曲线的回归方程为y=10.129Ln（x）+18.104（R2=0.993），六个重复间变异系数C．V．％为3.28，抑制中浓度I50为21.8μg／L和最低检测限I20为1.2μg/L；氟虫腈直接ELISA法抑制反应曲线在0.1～100μg／L氟虫腈浓度与抑制率有较好线性关系，标准曲线的回归方程为y=9.3554Ln（x）+24.36（R2=0.995），C．V．％为4.25，I50和I20分别为15.5μg／L和0.627μg／L。 分别采用吡虫啉间接ELISA法和氟虫腈直接ELISA法对两种农药的类似物及代谢物进行交叉反应试验。当吡虫啉对抗体抗原反应的抑制率为50％时，所需吡虫啉的浓度为21.8μg／L，吡虫清所需的浓度为1125μg／L，交叉反应率为1.9％，其摘要他的两种类似物的浓度大于5000拼g/L，交叉反应率均小于1 .0%;用抗氟虫睛抗体对氟虫睛四种代谢物进行交又反应试验时，抑制率为50%时，氟虫睛的浓度为巧.5林留L，四种代谢物的交叉反应率均大于80%，所以此法可用于氟虫睛及代谢物的检测。 以建立的两种ELISA分析方法，对土壤和水做了添加回收率试验，并与常规色谱分析进行比较。间接ELISA法测定土壤中毗虫琳的添加回收率为86.51 10.2%，cv.%4.679.64，在水中的添加回收率为86.4一104.2%，三个重复间的变异系数C.V.%为3.516.5;氟虫睛直接ELISA法在土壤中的添加回收率为79.583.2%，C.V.%为2.54一6.25，池水的添加回收率为76.2一79.8%，CV.%为5.949.85，均符合农残分析的要求。 本研究建立了毗虫琳间接EUSA法和氟虫睛直接ELISA法。在灵敏度、特异性和简便性等方面较理化分析具有明显的优势。进一步研究开发试剂盒，可适用于大量样本和现场样本的快速检测。