论文部分内容阅读
视网膜变性是一类因视网膜色素上皮(Retinal pigment epithelium,RPE)细胞和感光细胞受到不可逆性损伤而引起的致盲性疾病。近年来,许多研究表明局部使用辅酶Q10(Coenzyme Q10,CoQ10)能有效保护和治疗眼部病变,但是对于局部使用CoQ10在视网膜变性中的保护及作用机制尚不明确。本实验选用昆明系小鼠作为实验动物,通过给小鼠尾静脉单次注射NaIO3(50 mg/kg)建立视网膜变性模型,利用HE染色和GFAP免疫荧光染色技术分别对玻璃体内注射CoQ10的安全性和有效作用剂量进行评估和筛选;利用Rpe65、Rhodopsin和Opn1mw抗体特异性染色评价CoQ10对RPE细胞、视杆细胞和视锥细胞损伤的保护作用;进一步通过检测视网膜中细胞凋亡率、Bcl-2和Bax蛋白相对表达量、T-SOD活力和MDA含量、炎症因子TNF-а和IL-1β表达量的变化,以及Müller细胞的反应性胶质化和小胶质细胞的激活,探讨可能的作用机制。实验结果显示:⑴NaIO3诱导小鼠视网膜RPE细胞和外核层(Outer nuclear layer,ONL)细胞逐渐减少、ONL结构被破坏,损伤具有时间依赖性;⑵小鼠玻璃体内注射0.2μg和4μg的CoQ10对眼部无明显损伤,其中4μg的剂量对NaIO3诱导的视网膜变性具有保护作用,且对视杆细胞和视锥细胞的损伤均具有保护性;⑶NaIO3诱导后小鼠视网膜ONL中细胞凋亡率会显著上升,CoQ10通过上调Bcl-2蛋白和下调Bax蛋白的表达,抑制视网膜变性早期阶段的细胞凋亡;⑷CoQ10还对NaIO3诱导小鼠视网膜变性过程中T-SOD活力的下降、MDA含量的上升、炎症因子TNF-а和IL-1β表达量的升高、Müller细胞的反应性胶质化、小胶质细胞的激活具有显著抑制作用。本研究探讨了局部使用CoQ10对NaIO3诱导小鼠视网膜变性的保护作用。结果表明小鼠玻璃体内注射4μg的CoQ10可有效减缓感光细胞凋亡,抑制视网膜变性过程中的氧化应激、炎症反应、Müller细胞的反应性胶质化和小胶质细胞的激活,从而有效保护NaIO3诱导的视网膜变性。研究结果将为视网膜变性疾病的防护与治疗提供一定的借鉴与参考。