【摘 要】
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生物酶转化人参皂苷具有专一性强、反应条件温和、对环境友好以及高效催化等优点。生物酶转化一般以水作为反应介质,但酶的立体结构可能受到水极性的影响无法完全展开,从而降低了生物酶的转化能力。低共熔溶剂（Deep eutectic solvent,DES）作为新一代的绿色类离子液体,具有热稳定性好,生物相容性高,成本低,稳定酶结构等特点,可以作为一种酶催化转化介质用于生物酶转化。本论文主要以低共熔溶剂作为
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生物酶转化人参皂苷具有专一性强、反应条件温和、对环境友好以及高效催化等优点。生物酶转化一般以水作为反应介质,但酶的立体结构可能受到水极性的影响无法完全展开,从而降低了生物酶的转化能力。低共熔溶剂（Deep eutectic solvent,DES）作为新一代的绿色类离子液体,具有热稳定性好,生物相容性高,成本低,稳定酶结构等特点,可以作为一种酶催化转化介质用于生物酶转化。本论文主要以低共熔溶剂作为一种新型的非水酶催化反应介质,用于转化人参皂苷Rb1,研究低共熔溶剂对酶转化反应的影响。本文测定并分析了五种低共熔溶剂（氯化胆碱-乙二醇=1:2;氯化胆碱-尿素-乙二醇=1:1:1;氯化胆碱-1,2-丙二醇=1:2;氯化胆碱-聚乙二醇2000=1:1;氯化胆碱-聚乙二醇2000=1:2）的物理化学性质,探究了低共熔溶剂粘度和密度的变化规律。为了有效地解决低共熔溶剂本底对样品测定的问题,建立了高效液相色谱法,测定了低共熔溶剂中的人参皂苷Rb1、Rd、Rg3、F2、C-K和Rh2。以氯化胆碱-乙二醇,氯化胆碱-尿素-乙二醇低共熔溶剂混合磷酸盐缓冲液（PBS）作为酶催化反应介质,用于酶催化转化人参皂苷Rb1。DES（氯化胆碱-尿素-乙二醇=1:1:1）-PBS体系相比DES（氯化胆碱-乙二醇=1:2）-PBS体系酶催化转化效果更好,对DES（氯化胆碱-尿素-乙二醇=1:1:1）-PBS体系优化后条件:DES质量比为5%（wt%）,温度为50℃,pH值为4.0,人参皂苷Rd的转化率和酶活性分别为84.27%和135.11。与以常规反应介质水相比,人参皂苷Rd的转化率和酶活性均提高了3.01和13.91倍。使用聚乙二醇作为氢键供体,并以氯化胆碱-聚乙二醇2000低共熔溶剂混合PBS作为酶催化反应介质,用于酶催化转化人参皂苷Rb1,DES（氯化胆碱-聚乙二醇2000=1:1）-PBS体系的优化后条件:DES质量比为5%（wt%）,温度为35℃,pH值为5.0,人参皂苷Rd的转化率和酶活性分别为63.91%和79.89。论文还探索了以氯化胆碱-聚乙二醇2000与磷酸氢二钾组成双水相体系作为酶催化反应介质,用于酶催化转化人参皂苷Rb1。以低共熔溶剂-双水相体系为反应介质转化人参皂苷Rb1,在拓宽溶剂效应方面做了有益的探索。
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