【摘 要】
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为了探索生产工艺简单、成本低廉且具有较强抗原性和免疫原性的新型AD疫苗,该课题拟进行以下研究:①采用可增强外源性表位抗原性和免疫原性的乙型肝炎核心抗原(HBcAg)作为载
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为了探索生产工艺简单、成本低廉且具有较强抗原性和免疫原性的新型AD疫苗,该课题拟进行以下研究:①采用可增强外源性表位抗原性和免疫原性的乙型肝炎核心抗原(HBcAg)作为载体,通过基因工程技术,将Aβ<,1-42>基因融合于HBcAg的氨基端和其中间的主要免疫优势区(MIR),构建表达载体,在大肠杆菌中进行原核表达,制备AD基因工程疫苗(Aβ和HBcAg的融合蛋白);②通过免疫学方法检测该疫苗的抗原性和免疫原性;③在人神经母细胞瘤细胞系中,观察免疫血清对Aβ肽毒性的抑制作用.该课题的研究将为阿尔茨海默病基因工程疫苗的动物实验和临床研究打下基础.结论:1 将Aβ<,1-42>的基因融合于HBcAg的氨基端和中间MIR区,构建了重组克隆载体和原核表达载体.2 首次在大肠杆菌中表达了Aβ与HBcAg融合基因,制备了AD基因工程疫苗.3 HBcAg MIR区融合蛋白的Aβ抗原性和免疫原性显著高于氨基端融合,说明MIR区是Aβ<,1-42>的理想融合部位.4 用制备的AD疫苗免疫BALB/c小鼠,其免疫血清可抑制Aβ<,1-42>肽对SK-N-SH细胞的毒性作用,从细胞水平证明了AD基因工程疫苗的有效性,为其应用于动物模型和临床试验打下了基础.
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