禽流感病毒基因组测序与分析及五步蛇毒腺基因表达研究

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近年来,禽流感在我国和世界各地频繁爆发,严重威胁人类的健康,造成了极大的经济损失。为了研究禽流感病毒的进化机制和变异规律,我们收集了152株近年来在我国各地传播的禽流感病毒,并通过RT-PCR测序的方法,完成了基因组测序工作。   通过进化分析发现,H5N1亚型禽流感病毒可以分成新旧两个大组,2003年为两组的交界点。分析表明,进化分组主要是由病毒的采样时间决定的,而与宿主及采样地域没有明显的对应关系。进一步分析发现,禽流感病毒PB2、PB1、PA和NS四个基因的进化速度快于整个基因组进化的速度, HA、NP、NA和M四个基因片段的进化速度慢于整个基因组进化的速度。对H9N2病毒的进化分析则表明在我国大陆流行的H9N2亚型禽流感病毒相对保守。   根据H5N1禽流感病毒分组的统计,利用两组病毒蛋白序列的一致性序列比对,总结出了H5N1病毒各个基因片段在新旧两组间的蛋白序列差异位点。筛选出来的蛋白位点,为下一步深入研究新旧组演变机制提供了靶位点。对禽流感病毒蛋白序列研究发现,HA蛋白具有连续碱性氨基酸残基的切割位点,另外新组病毒HA蛋白339位有48%的病毒突变为G,这一氨基酸残基的替换可能会使病毒的毒力变强。旧组的病毒NA和NS1蛋白具有缺失,而新组则没有,由此可见这两个缺失是新旧分组的一个重要标志,可能在一定程度上推动了新组的产生和逐渐替代旧组的过程。   通过分析我们认为华南及东南亚是新组禽流感病毒的起源地,并随着鸟类的迁徙传播到我国各地。禽流感病毒在留鸟、留鸟、禽类、家畜、野生动物和人类之间已经形成了复杂的网络传播结构。
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