【摘 要】
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目的:探讨人剪切修复基因XPD(Xeroderma pigmentosum D)转染至人肝癌SMMC-7721细胞后,对肿瘤细胞增殖、迁移、凋亡以及PTEN基因表达的影响。方法:本实验使用脂质体Lipofectam
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目的:探讨人剪切修复基因XPD(Xeroderma pigmentosum D)转染至人肝癌SMMC-7721细胞后,对肿瘤细胞增殖、迁移、凋亡以及PTEN基因表达的影响。方法:本实验使用脂质体Lipofectamine TM 2000作为载体介质,用瞬时转染法将空载质粒pEGFP-N2和重组质粒pEGFP-N2-XPD转染入人肝癌细胞株SMMC-7721细胞内。实验分为四个组:空白对照组、脂质体组、pEGFP-N2组、pEGFP-N2-XPD组。通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达;蛋白印迹(Western blotting)法检测肿瘤细胞中XPD和PTEN蛋白的表达水平;MTT法检测肿瘤细胞的增殖水平;Transwell实验观测肿瘤细胞迁移能力的改变;流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡水平。结果:转染空载质粒pEGFP-N2和重组质粒pEGFP-N2-XPD的人肝癌SMMC-7721细胞在荧光显微镜下均可见绿色荧光,表明转染有效。pEGFP-N2-XPD组与其它三组相比:XPD和PTEN蛋白的表达量均明显增加(p<0.01);细胞的增殖能力均明显减弱(p<0.01);细胞的迁移能力均明显下降(p<0.05);细胞的凋亡率均明显上升(p<0.01)。结论:XPD能促进PTEN基因的表达,并能抑制肝癌细胞的增殖、迁移,促进其凋亡。
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