广东凉茶颗粒物质基础及指纹图谱研究

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广东凉茶颗粒(广州王老吉药业股份有限公司)为棕色的颗粒,是由岗梅、金樱根、山芝麻、五指柑、淡竹叶、木蝴蝶、布渣叶、火炭母、金沙藤、广金钱草十味中药,辅以蔗糖粉组成,味甜、苦;具有清热解暑,祛湿生津的作用,用于四时感冒,发热喉痛,湿热积滞,口干尿黄。广东凉茶颗粒属于凉茶中的药品类,但到目前为止对其物质基础及其指纹图谱等的相关研究文献报道却很少。随着2006年凉茶申遗的成功,广东凉茶颗粒运用科学的语言阐述其作用机制和原理已势在必行,故在此基础上,本文对其进行了系统的化学成分和指纹信息研究,研究结果如下。1.广东凉茶颗粒系统预试验:研究结果表明:其含有黄酮类、酚类、糖类、皂苷、甾萜类、内酯和香豆精等化学成分,可能含有鞣质、蒽醌、有机酸,这为进一步进行广东凉茶颗粒物质基础的提取与分离工作奠定了基础。2.广东凉茶颗粒TLC指纹图谱研究:结果表明:(1)广东凉茶颗粒经不同极性大小的溶剂萃取所得的不同极性部位所含化学成分种类均较多;(2)不同极性部位不同展开体系所得结果不相同,更进一步说明化学成分极性分布较广;(3)同一极性部位不同吸附材料所得结果会有差异,说明吸附材料会对分析结果产生影响;(4)TLC显示不同批次的广东凉茶颗粒薄层结果一致,说明其质量稳定。3.广东凉茶颗粒化学成分研究:本研究依次采用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇对广东凉茶颗粒的甲醇提取物进行萃取,减压浓缩得到石油醚相、乙酸乙酯相和正丁醇相。本研究对乙酸乙酯相和正丁醇相采用正相硅胶柱色谱、反向硅胶柱色谱、凝胶柱色谱及高效液相色谱等色谱分离方法进行分离纯化,从中分离得到单体化合物24个,经理化性质和光谱数据分析及文献对照等方法确定其中22个化合物结构,依次为:ilexasosidesI(1)、冬青苷 B(ilexsideB,2)、asprellanosidesB(3)、asprellanosideA(4)、2a,3a,19a-三羟基乌苏-12-烯-28-酸 28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2a,3a,19a-trihydroxyursa-12-en-28-oic acid β-D-glucopyranosyl ester,5)、2a,3β,19a-三羟基乌苏-12-烯-28-酸 28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2a,3β,19a-trihydroxyursa-12-en-28-oic acid β-D-glucopyranosyl ester,6)、2a,3β,19a,23-四羟基乌苏-12-烯-28-酸28-O-B-D-吡喃葡萄糖苷(2α,3β,19α,23-tetrahydroxyurs-12-en-28-oic acid β-D-glucopyranosyl ester,7)、4-p-香豆酸-D-吡喃葡萄糖苷(4-p-cumaroyl-D-glucose,8)、绿原酸(chlorogenic acid,9)、6-hydroxy-4β-(4-hydroxy-3-methoxyphenol)-3α-hydroxylmethl-5-methoxy-3,4-2-naph-thaldehyde(10)、咖啡酸(caffeic acid,11)、反式-对香豆酸(E-p-coumatic acid,12)、异佛来心苷(isoviolanthin,13)、4’,5,7-三羟基黄酮-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4’,5,7-trihydroxyflavone-6-O-β-D-glucopyranosyl ester,14)、木犀草素-6-C-葡萄糖苷(6-C-glycopyranosylluteolin,15)、(+)-儿茶素((+)-catechin,16)、3-甲氧基-4’-鼠李糖鞣花酸(3-O-methy-lellagic acid 4’-O-rhamnopyranoside,17)、原儿茶酸甲酯(protocatechuic acid methyl ester,18)、原儿茶酸(protocatechuric acid,19)、没食子酸(gallic acid,20)、对羟基苯甲酸(p-hydroxybenzoic acid,21)、蔗糖(sucrose,22)。其中化合物1为新化合物,是含有一个硫酸酯基的乌苏烷型单糖三萜苷类化合物,化合物8为新的天然产物。化合物1-10、12-15、17-18均为首次从广东凉茶颗粒中分离得到,也首次从广东凉茶颗粒中分离得到三萜类化合物。4.广东凉茶颗粒指纹信息研究:本实验在已建立的广东凉茶颗粒的基峰离子流图的基础上,继续对其95个主要色谱峰进行确认,鉴定了其中16个色谱峰,且根据TOF-MS高分辨质谱和IT-MS的多级质谱碎片信息推测出第80号色谱峰的可能结构,这为建立完整的广东凉茶颗粒质量控制标准奠定了基础。
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