论文部分内容阅读
目的用高效液相色谱法(HPLC)对细辛含药血清中甲基丁香酚和马兜铃酸A(AA I)的含量进行测定,旨在为临床安全有效地使用细辛和客观评价细辛提供实验依据,并建立起测定细辛含药血清中甲基丁香酚和AA I的含量的HPLC方法。方法1细辛含药血清的制备将北细辛根茎置于电热干燥箱中干燥1h(温度40℃),然后经球磨粉碎机研磨粉碎,过5号筛(80目),即得细辛散剂,置于阴凉处密封保存备用。将成年SD大鼠随机分成两组,即空白血清组和含药血清组。其中细辛含药血清组的细辛用药剂量为1.78g/kg；空白血清组给予等量的生理盐水。每天给药2次,连续8天。在最后一次给药2h后对大鼠进行眼眶采血。将所采血液在室温下静置30min后取上清液,3000rpm离心20min,分离血清,取血清2ml,滴加甲醇8ml,混匀,2500rpm离心10min,取上清液,水浴65℃挥去甲醇,余液浓缩,过0.22μm微孔滤膜滤过除菌,分装,-20℃条件下保存备用。2 HPLC对细辛含药血清中甲基丁香酚含量的测定用HPLC法,仪器为戴安高效液相色谱仪：P680型输液泵、在线脱水机、手动进样器、TCC-100柱温箱、PDA-100二极管阵列检测器、chromeleon色谱工作站。条件：色谱柱为Diamon TMODS-C18(250mm×4.6mm,5μm)；流动相为甲醇-水-0.025mol/1磷酸(78：21：1)；柱温为室温；检测波长为250nm；流速为1ml/min;进样20μl,测定细辛含药血清中甲基丁香酚的含量。3 HPLC对细辛含药血清中AAⅠ含量的测定用HPLC法,仪器为戴安高效液相色谱仪：P680型输液泵、在线脱水机、手动进样器、TCC-100柱温箱、PDA-100二极管阵列检测器、chromeleon色谱工作站。条件：色谱柱为Diamon TMODS-C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-水-醋酸(72：27：1)；柱温为室温；检测波长为390nm；流速为1ml/min;进样20μl,测定细辛含药血清中AAⅠ的含量。结果细辛含药血清中甲基丁香酚的含量为0.0032mg/ml。细辛含药血清中AAⅠ的含量低于检测限。结论1初步开展了HPLC法对细辛含药血清中甲基丁香酚和AAⅠ的含量测定；2建立了测定细辛含药血清中甲基丁香酚和AAⅠ的HPLC方法；3细辛含药血清中含有一定血药浓度的甲基丁香酚,不含AAⅠ。