二价阳离子调节SKOV3卵巢癌细胞黏附、侵袭和转移的实验研究

来源 :南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:june_jt
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目的:探讨二价阳离子对SKOV3卵巢癌细胞黏附、侵袭和转移的影响。方法:根据不同二价阳离子(Ca2+, Zn2+, Mn2+)浓度分为:(1)空白对照组,(2)Mn2+(0.25mM)组,(3) Ca2+(2.5,5.0, 10.0mM)组,(4) Mn2+(0.25mM)+Ca2+(2.5,5.0, 10.0mM)组,(5)Zn2+(1.0, 10.0mM)组,(6) Mn2+(0.25mM)+Zn2+(1.0, 10.0mM)组,并作用于SKOV3卵巢癌细胞,分别进行黏附、侵袭和转移实验。1、黏附实验:96孔板中加入Matrigel胶,细胞接种后,二价阳离子作用30mmin,光学显微镜下观察细胞形态变化,细胞计数;计算细胞黏附率2、侵袭实验:Transwell小室中加入Matrigel胶,细胞接种后,二价阳离子作用24h,在570 nm波长的酶标仪下测定各组侵袭细胞的OD值,计算细胞侵袭率。3、转移实验:细胞接种入Transwell小室中,二价阳离子作用24h后,在570 nm波长的酶标仪下测定各组转移细胞的OD值,计算细胞转移率。结果:1、黏附实验:SKOV3卵巢癌细胞在二价阳离子作用下培养30mmin后,在96孔板中分布均匀,大小一致,形态成圆形或短梭状,核深染,透光度较差。在Ca2+(2.5-10mM)组,黏附细胞随Ca2+浓度增加逐渐减少,黏附抑制率从10.2±7.3%到62.2±4.7%不等(n=3,P<0.05)。Mn2+(0.25mM)+Ca2+(2.5-10mM)组,与Mn2+(0.25mM)组相比,黏附细胞均显著减少,最大抑制浓度为10mM(65.3±3.8%, n=3, P<0.05)。Zn2+浓度在1mM时,黏附细胞略有增多;在10mM时,黏附细胞数量显著降低,黏附抑制率为76.1±2.3%。在Mn2+(0.25mM)+Zn2+(1-10mM)组,与Mn2+(0.25mM)组相比,Zn2+浓度在10mmM时,黏附细胞显著减少,最大抑制浓度为10mM(71.6±1.9%,n=3,P<0.05)。2、侵袭实验:SKOV3卵巢癌细胞在二价阳离子作用下培养24h后,穿过Matrigel胶后黏附在Transwell小室下室面,分布均匀,大小一致,形态成圆形或不规则状,核深染,透光度较差。在Ca2+(2.5-10mM)组,侵袭细胞随Ca2+浓度增加逐渐减少,酶标仪检测OD值显示逐渐降低,侵袭抑制率从24.8±3.8%到63.2±1.2%不等(n=3,P<0.05)。在Mn2+(0.25mM)+Ca2+(2.5-10mM)组,与Mn2+(0.25mM)组相比,侵袭细胞均显著减少,最大抑制浓度为10mM(72.8±1.1%, n=3, P<0.05)。在Zn2+(1-10mM)组,随着Zn2+浓度的增加,侵袭细胞逐渐减少,酶标仪检测OD值显示逐渐降低,侵袭抑制率从66.0±2.2%到87.9±1.2%不等(n=3,P<0.05)。在Mn2+(0.25mM)+Zn2+(2.5-10mM)组,与Mn2+(0.25mM)组相比,侵袭细胞均显著减少,最大抑制浓度为10mM(90.8±0.9%, n=3, P<0.05)。3、转移实验:SKOV3卵巢癌细胞在二价阳离子作用下培养24h后,黏附在Transwell小室下室面,分布均匀,大小一致,形态成圆形或不规则状,核深染,透光度较差。在Ca2+(2.5-10mM)组,转移细胞随Ca2+浓度增加逐渐减少,酶标仪检测OD值显示逐渐降低,转移抑制率从22.4±3.3%到55.5±5.5%不等(n=3,P<0.05)。在Mn2+(0.25mM)+Ca2+(2.5-10mM)组,与Mn2+(0.25mM)组相比,转移细胞均显著减少,最大抑制浓度为10mM(75.6±3.3%,n=3,P<0.05)。在Zn2+(1-10mM)组,随着Zn2+浓度的增加,转移细胞逐渐减少,酶标仪检测OD值显示逐渐降低,转移抑制率从73.2±1.3%到91.7±0.2%不等(n=3,P<0.05)。在Mn2+(0.25mM)+Zn2+(2.5-10mM)组,与Mn2+(0.25mM)组相比,转移细胞均显著减少,最大抑制浓度为10mmM(93.4±0.9%,n=3,P<0.05)。结论:SKOV3卵巢癌细胞受到体外二价阳离子浓度的影响,Ca2+和Zn2+能够抑制细胞的黏附、侵袭和转移功能,同时能显著降低Mn2+对细胞黏附、侵袭和转移功能的促进作用。
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