覆盆子化学成分及质量标准研究

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覆盆子为蔷薇科植物华东覆盆子Rubus chingii Hu的干燥果实。用于小便频数、肾虚遗尿、遗精漏精、阳痿早泄等症的治疗,具有补肾、固精、明目之功效。覆盆子是肾宝合剂的主要药味之一,并为方中单味药材成本最贵的药材,现标准收载于《中国药典》2010年版一部359页。本课题对覆盆子70%乙醇提取物的氯仿部分、乙酸乙酯部分和正丁醇部分的化学成分进行了研究,应用多种色谱分离技术分离得到了18个化合物,通过各种波谱学方法鉴定了化合物的结构,分别为:15,18-di-O-β-D-glucopyranosyl-13(E-ent-labda-7(8),13(14)-diene-3β,15,18–triol(1)、15,18-di-O-β-D-glucopyranosyl-13(E)-ent-labda-8(9),13(14)-diene-3β,15,18-triol(2)、15-O-β-D-apiofuranosyl-(1→2)-β-D-glucopranosyl-18-O-β-D-glucopyranosyl-13(E)-ent-labda-8(9),13(14)-diene-3β,15,18-triol(3)、紫云英苷(4)、对羟基间甲氧基苯甲酸(5)、对羟基苯甲酸(6)、没食子酸(7),没食子酸乙酯(8)、(7S,8R)-二氢去氢二愈创木基醇(9)、5-[3-羟甲基-5-(3-羟丙基)-7-甲氧基-2,3-二氢苯并呋喃基]-2-愈创木酚(10)、4-[3-羟甲基-5-(3-羟丙基)-2,3-二氢苯并呋喃基]-2-愈创木酚(11)、1-氧代-1,2-二氢异喹啉-4-羧酸(12)、鞣花酸(13)、椴树苷(14)、山柰酚-3-O-芸香糖苷(15)、13(E)-ent-Labda-8(17),13-diene-3β,15,18-triol(16)、13(E)-ent-Labda-8(17),13-diene-3α,15,18-triol(17)、覆盆子苷F5(18),其中化合物1-3为新化合物,9-12为首次从该植物中分离得到。在2010版《中国药典》一部中,覆盆子检测项目下仅有性状和粉末鉴别,基于我们对覆盆子化学成分研究基础,采用薄层色谱法分别建立了鞣花酸和椴树苷的薄层鉴别;采用高效液相法分别测定了覆盆子中鞣花酸和山柰酚-3-O-芸香糖苷的含量。其中,鞣花酸的含量测定方法为:采用ODS柱(Diamonsil C18色谱柱,250mm×4.6mm,5μm),以乙腈-0.2%磷酸(15:85)为流动相,流速:1.0ml/min,检测波长254nm,鞣花酸在0.01593~0.09558μg范围内,峰面积Y与进样量X(μg)呈良好的线性关系,回归方程为Y=9.0×106X-3514.2,相关系数:R2=0.9993(n=6),平均回收率为103.1%,RSD为1.4%;山柰酚-3-O-芸香糖苷的含量测定方法为:采用ODS柱(Welch C18色谱柱,250mm×4.6,5μm),以乙腈-0.2%磷酸(15:85)为流动相,流速:1.0ml/min,检测波长344nm,山柰酚-3-O-芸香糖苷在0.0789~1.1835μg范围内,峰面积Y与进样量X(μg)呈良好的线性关系,回归方程为Y=1.0×106X-9996.0,相关系数:R2=0.9999(n=6),平均回收率为101.9%,RSD为0.7%。利用上述建立的高效液相色谱法分别测定了不同产地的10批覆盆子中鞣花酸和山柰酚-3-O-芸香糖苷的含量,结果证明该方法简便、准确、重现性好,可作为覆盆子中鞣花酸和山柰酚-3-O-芸香糖苷的定量分析方法。对不同产地的10批覆盆子的水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物和农药残留进行了研究,制定了合理的检查限度。本文制定的覆盆子质量标准,拟收载于2015版《中国药典》一部。
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